猪A型塞内卡病毒（Senecavirus A,SVA）可导致猪的鼻吻、蹄冠状带部出现水泡样病变,发病严重时,猪蹄冠部的溃疡蔓延至蹄底部,造成蹄壳松动甚至脱落,病猪出现跛行现象,新生仔猪（7日龄以内）偶尔伴有腹泻症状,死亡率高达30%-70%。伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus,PRV）常引起妊娠母猪繁殖功能障碍和初生仔猪出现神经症状,仔猪感染率和死亡率极高,给各国养猪业带来了巨大经济损失。本课题组在前期的流行病学调查中发现了SVA与PRV共存的现象,并且在临床上,部分有SVA感染史的猪场出现PRV感染时,其发病程度较常规PRV感染更为严重,病情更加难以遏制。因此本论文研究推测,SVA和PRV混合感染可能出现协同致病的情形。为了验证这一推测,本论文研究首先利用猪肾传代细胞系（PK-15）构建了SVA与PRV的体外混合感染模型,在细胞水平探究了两种病毒混合感染对其病毒复制能力、病毒蛋白的细胞内定位及细胞因子转录水平的影响,证实了SVA能促进PRV的复制,并发现转染SVA 3C蛋白过表达质粒可显著促进PRV的复制。随后,本论文研究选取35日龄断奶仔猪作为体内研究模型,评估SVA与PRV混合感染的协同致病性,证实SVA能促进PRV对断奶仔猪的致病性。具体研究结果如下:1、SVA与PRV能够同时在PK-15细胞内复制,PRV对SVA的复制没有显著影响,但C组（SVA与PRV同时感染细胞）以及D组（细胞先感染SVA后感染PRV）的PRV病毒载量在12 hpi之后显著高于B组（PRV单独感染细胞）,E组（细胞先感染PRV后感染SVA）的PRV病毒载量在30 hpi之后显著高于B组（PRV单独感染细胞）。2、SVA与PRV在单独感染或混合感染时,PK-15细胞的IFN-βm RNA水平均显著上调;A组（SVA单独感染细胞）显著高于B组（PRV单独感染细胞）;C组（SVA与PRV同时感染细胞）以及D组（细胞先感染SVA后感染PRV）与A组（SVA单独感染细胞）的IFN-βm RNA水平相当;E组（细胞先感染PRV后感染SVA）与B组（PRV单独感染细胞）的IFN-βm RNA水平相当。3、SVA或PRV单独感染或混合感染PK-15细胞时,SVA VP1及PRV g B蛋白在细胞内的定位存在差异,SVA或PRV单独感染时病毒蛋白几乎都集中在胞浆内,但混合感染时SVA VP1和PRV g B蛋白出现部分入核的现象。4、转染SVA 3C蛋白的过表达质粒对PRV在PK-15细胞内的复制有显著促进作用,而转染SVA其他结构蛋白的过表达质粒对PRV在PK-15细胞内的复制无显著影响。5、体内实验结果表明,SVA与PRV混合感染并没有显著影响SVA以及PRV的排毒周期,SVA排毒时间为攻毒后第3天至攻毒后第9天,而PRV排毒时间为攻毒后第2天至攻毒后第8天。但SVA与PRV混合感染组的病情（以食欲不振、体重减轻、发烧、原地转圈、撞墙、脑内有胶质结节形成等PRV感染的典型特征作为评判标准）比PRV单独感染组更严重,病情在攻毒后第4天最严重,导致2/7仔猪死亡。PRV单独感染组没有仔猪死亡。总之,以上体外和体内研究结果表明,SVA能够促进PRV繁殖,与PRV协同致病。这为探究SVA和PRV协同致病机制提供了研究模型和理论基础,也为PRV疫苗研制策略提供了新思路。