由条形柄锈菌小麦专化性（Puccinia striiformis f.sp.tritici,Pst）引起的条锈病严重威胁小麦生产。种植抗病品种是防治小麦条锈病最经济有效的措施。然而,条锈菌毒性变异频繁,导致抗病品种极易丧失抗性。小麦条锈菌通过分泌效应子调控寄主免疫,因此,亟需加强对条锈菌效应子致病机理的研究,并进一步利用HIGS（Host-induced gene silencing）技术创制小麦稳定抗条锈材料,为病害的持久绿色防控提供理论基础与材料支撑。本研究一方面对效应子Pst03724调控小麦免疫机理进行了解析,另一方面对已创制的高代RNAi转基因株系进行抗病性评价,获得如下结果。1.本研究通过酵母双杂交筛选获得了条锈菌效应子Pst03724的候选靶标Ta CaM3-2B,并利用GST pull-down和Co-IP技术进一步验证Pst03724与Ta CaM3-2B之间的互作关系。烟草亚细胞定位试验显示,Ta CaM3-2B定位于细胞质和细胞核中。借助细菌Ⅲ型分泌系统在小麦中瞬时过表达Ta CaM3-2B后,发现过表达小麦中胼胝质和H2O2的积累显著升高,小麦对条锈菌的抗性显著提升。CaMs（Calmodulin）作为NADKs（NAD kinases）的激活剂,是连接Ca2+信号传导和NAD信号传导的重要枢纽。因此我们通过酵母双杂交技术及荧光素酶互补技术证实Ta CaM3-2B与Ta NADK2存在互作关系。随后利用VIGS技术在小麦中瞬时沉默Ta NADK2后,发现沉默植株H2O2含量显著降低,且条锈菌菌丝长度和菌丝面积显著增加,小麦对条锈菌的抗性显著降低。为了进一步探索效应子Pst03724如何调控靶标,我们通过体外原核表达技术获得Pst03724、Ta CaM3-2B和Ta NADK2的蛋白,并检测Pst03724对Ta CaM3-2B激活Ta NADK2酶活的影响,发现Pst03724可以抑制Ta CaM3-2B对Ta NADK2的激活。综上表明,效应子Pst03724通过抑制Ta CaM3-2B对小麦抗条锈病正调节因子Ta NADK2的激活从而促进自身侵染。2.通过对已获得的3份Ps CPK1-RNAi和2份Ps FUZ7-RNAi的T7代植株的株高、粒数、穗数进行调查分析,发现与对照XN1376相比均无显著性差异。通过对条锈病发病等级进行统计分析,发现人工接菌后Ps CPK1-RNAi和Ps FUZ7-RNAi发病等级相较于XN1376有明显降低。综上表明Ps CPK1-RNAi和Ps FUZ7-RNAi的T7代转基因材料均表现出良好抗病性,且农艺性状较野生型无明显差异。