研究背景和目的： 作为威胁人类健康的主要疾病，以胰岛移植为代表的细胞替代治疗具有一定的优势，但供体来源不足的问题限制了其在糖尿病中治疗中的应用。胰腺干细胞由于具备一定的增殖能力而备受瞩目。利用简便易行的方法得到具有向内分泌方向分化能力的胰腺干细胞是临床应用的基础。另一方面，因为干细胞在功能上与成熟细胞有一定距离，如何促进胰腺干细胞的成熟使其在体内环境中更好的发挥作用，也是干细胞移植临床应用的关键。基于此，本实验以SD大鼠及人骨髓间充质干细胞为研究对象，探讨了胰腺干细胞的分离、培养及促成熟的方法，为干细胞移植在糖尿病治疗中的临床应用提供实验依据。 研究内容： 1．为探索胰腺干细胞培养比较简便的方法，本研究采用了组织块培养法及胶原酶消化法两种方法培养SD大鼠的幼鼠胰腺，并以免疫荧光、双硫腙染色、放免测定胰岛素、扫描电镜及透射电镜等方法对所培养细胞作出鉴定。 2．用携带VEGF基因的腺病毒质粒转染培养得到的细胞，以MTT法观察了该质粒转染对于培养细胞增殖能力的影响；然后，将四种不同培养条件的细胞：未分化组、分化组、GFP组、VEGF组移植入建立了糖尿病模型的BALB／c鼠(裸鼠)肾包膜下，观察移植细胞对于糖尿病BALB／c鼠血糖、体重、生存期、胰岛素水平的影响。将移植肾切除制备病理切片并行CD34免疫组化染色，观察VEGF基因转染后对于移植细胞周围环境微血管形成及成熟情况的影响。 3．利用大鼠胎胰组织的提取液，体外培养人骨髓间充质干细胞，探讨其转化为胰腺干细胞的可能性。