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黑果腺肋花楸中花色苷含量丰富,可作为天然色素的新来源。为提高黑果腺肋花楸的利用度,本文采用纤维素酶酶解-乙醇提取技术提取花色苷,并优化提取条件;借助AB-8大孔树脂对花色苷粗提物进行分离纯化,通过研究静态和动态吸附解吸条件,优化纯化工艺;通过测定花色苷对DPPH自由基和羟自由基的清除能力,评价花色苷的抗氧化活性;建立H2O2诱导的HepG2细胞氧化损伤模型,探究花色苷对细胞氧化损伤的保护作用和机制。主要研究结果如下:1.通过单因素和响应面设计确定酶解-溶剂提取的最优条件为:酶用量0.03%,酶处理温度51.76℃,酶处理时间1.29 h。在此条件下,花色苷提取量为3.16 mg/g,与简单醇提法相比,提高了 45.24%,说明纤维素酶能显著提高黑果腺肋花楸花色苷的提取量。2.选用AB-8大孔树脂对粗品花色苷进行分离纯化,通过研究静态-动态吸附解吸条件,确定最佳纯化条件为:上样液浓度10.51 mg/mL,上样液pH 2.0,上样液流速1.5 mg/mL,上样量12 BV(柱体积),水洗量为7BV,乙醇浓度90%,洗脱所需乙醇量为2 BV。在该条件下,纯化后样品为紫黑色粉末,花色苷含量为80.8%,提高了约5倍。纯化后样品色价为252.7,提高了约15倍。3.黑果腺肋花楸花色苷具有良好的抗氧化活性,对DPPH自由基和羟基自由的清除能力随浓度增大而增大,半抑制率IC50值分别为0.009 mg/mL和0.444 mg/mL。4.黑果腺肋花楸花色苷对HepG2细胞的氧化损伤具有保护作用。建立HepG2细胞氧化损伤模型的条件:210 μmol/L的H2O2处理4 h,模型组细胞的存活率67.92%。选用三个浓度(20 μg/mL、100 μg/mL、200 μg/mL)的花色苷溶液对细胞进行预保护,存活率分别提高至79.34%,94.55%和87.72%。此外,花色苷还能显著降低培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活力和丙二醛(MDA)的含量,提高细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的水平(p<0.05)。流式细胞术检测结果表明,黑果腺肋花楸花色苷能使氧化损伤细胞的早期凋亡率从9.74%降低到0.06%～4.41%之间。说明黑果腺肋花楸能提高肝细胞的抗氧化活力,并对细胞的氧化损伤具有保护作用。