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肺癌是人类最常见的恶性肿瘤之一。近二十年来,持续增长的烟草消费和环境污染使我国肺癌发病率和死亡率一直呈上升趋势。肺癌已成为目前威胁我国居民生命和健康的重要疾病之一,亦是亟待解决的重大公共卫生问题。在肺癌患者中,约85%的病例是非小细胞肺癌（Non-Small Cell Lung Cancer,NSCLC）,因此对其进行研究具有重要的临床价值。手术是治疗早期非小细胞肺癌治疗的主要手段,但术后复发率较高。然而大部分患者在就诊时已是中晚期,只能接受以化疗为主的全身治疗。TNM分期和病理组织学类型是目前判断NSCLC预后的主要依据。但是,往往具有同样临床特征的NSCLC患者,即便采用同样的治疗手段,其病情进展和生存时间却常常可有很大的差异。越来越多的研究表明,个体遗传因素在这种预后差异中扮演了重要的角色。因此,寻找包括单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphism,SNP）在内的一些遗传分子标志物用于提高临床预后的预测价值,是目前国内外肿瘤学研究领域的热点。单核苷酸多态性是最常见的遗传学改变。大量研究表明,SNP可以通过影响基因的表达、结构和功能,进而影响肿瘤的发生发展。因此,本研究选择具有潜在功能性的位于microRNA（miRNA）与靶基因结合位点的SNP,探讨这类SNP与非小细胞肺癌预后的关联。第一部分MiRNA-200b/c结合位点基因多态性与晚期非小细胞肺癌预后的关联研究MiR-200家族在许多肿瘤中发挥肿瘤抑制功能,miR-200b和miR-200c是目前研究得最广泛和深入的。单核苷酸多态性可以通过产生新的miRNA结合位点,或破坏已有的结合位点,来影响miRNA与靶基因的亲和力。[目的]探讨同时位于miR-200b和miR-200c与靶基因结合位点的SNP与晚期NSCLC患者预后的关联。[方法]我们的研究仅限于Ⅲ期或Ⅳ期未手术、接受铂类为一线化疗的非小细胞肺癌患者。第一阶段（1期）纳入303例患者,招募于南京医科大学第一附属医院和附属肿瘤医院。第二阶段（2期）纳入340例患者,招募于上海胸科医院和南京胸科医院。所有患者均为组织病理学或细胞学确诊的NSCLC,并至少由两名病理医师确诊。通过在线预测软件,我们共得到10个可能影响miR-200b/c与靶基因结合的SNP位点。1期和2期样本基因分型均采用Sequenom MassARRAY iPLEX平台。我们采用荧光素酶报告基因对阳性位点进行功能研究。[结果]10个位点在1期303例标本中均进行了基因型的分析,所有SNP均符合 Hardy-Weinberg 平衡（HWE）。只有一个 SNP 位点 rs17224177 与 NSCLC生存显著相关,我们将这个位点在2期340例样本中进行了验证。我们发现rs17224177在两阶段实验中均与NSCLC总生存期相关,尤其在合并样本中（相加模型:校正HR=1.70,95%CI:1.24-2.34）。生物信息学分析rs17224177的突变型等位基因G可能会破坏miR-200b/c与靶基因GLT8D3的结合。我们构建了含GLT8D3 3’UTR的荧光素酶报告基因质粒（分别含有rs17224177 A和G等位基因）。结果显示转染含有rs17224177 G等位基因的荧光素酶表达水平较转染A等位基因的荧光素酶表达明显增高（A549细胞株,报告基因质粒分别与miR-200b,miR-200c 同时转染,P值分别为P<0.0001,P=0.0053）。[结论]GLT8D3 rs17224177 A>G会破坏基因与miR-200b/c的亲和力,并增加晚期NSCLC患者的死亡风险。第二部分MiR-502与SET8结合位点多态性与非小细胞肺癌患者预后的关联研究基因多态性可以通过产生新的miRNA结合位点,或破坏已有的结合位点,来影响miRNA与靶基因的结合。SET8蛋白是一个含有SET结构域的甲基转移酶,在多种生物学过程中发挥重要作用。[目的]探讨一个位于SET8 3’UTR与miR-502结合位点的功能性SNP,rs16917496 T>C,与NSCLC患者预后的关联。[方法]本研究的所有病例均来自南京医科大学第一附属医院。采用Taqman基因分型技术,我们在576例NSCLC血液标本中对rs16917496进行基因分型。之后,我们用荧光素酶报告基因对该位点进行功能研究,并用与血液标本匹配的病理切片进行免疫组化染色来进一步验证。[结果]Log-rank检验和Cox回归模型均提示rs16917496 CC基因型与较长的总生存期和较低的死亡风险显著相关（Log-rank P=0.031;共显性模型:粗HR=0.44,95%CI:0.26-0.74）。逐步 Cox 回归分析显示 rs16917496 是 NSCLC 患者预后的独立预测因子。并且该位点与NSCLC预后的关联在不吸烟患者、接受化疗的患者和没有糖尿病的患者中更为显著。交互作用分析显示rs16917496与吸烟状况存在显著的相乘模型的交互作用,校正后P值为<0.001。荧光素酶报告基因显示,rs16917496的突变型C等位基因可以通过增强miR-502与SET8的结合能力,来下调SET8的表达。同时,对192例病例切片进行免疫组化染色显示,CC基因型与SET8蛋白低表达相关（P=0.007）。SET8低表达的患者总生存期较长。[结论]我们的研究表明,SET8 3’UTR rs16917496 T>C可以预测非小细胞肺癌患者的预后。Rs16917496通过影响miR-502与SET8的结合来调节SET8的表达,进而影响非小细胞肺癌患者的预后。