骨髓间充质干细胞定向分化及其静脉移植治疗脊髓损伤机制研究

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脊髓损伤(Spinal cord injury, SCI)是一种严重的中枢神经系统损伤,有高度的致残性,对其治疗一直是研究的热点。近年来研究发现,骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells, MSCs)移植可促进SCI修复。本研究根据MSCs贴壁生长的特性,体外分离、扩增、纯化MSCs,使用流式细胞仪进行细胞表面标志物鉴定,定向培养,不同诱导液诱导MSCs向神经元分化,根据重物坠落法(Weight dropping, WD)原理制备大鼠脊髓损伤模型,通过大鼠尾静脉回输间充质干细胞治疗脊髓损伤,采用改良Tarlov评分记录大鼠运动功能恢复程度,荧光标记法记录移植细胞体内迁移情况,观察移植的MSCs在大鼠损伤脊髓处的转化情况,探讨MSCs对模型大鼠脊髓损伤治疗作用的机制。本研究结果显示:1、体外成功分离骨髓间充质干细胞,并进行扩增及纯化,流式细胞仪进行细胞表面标志物鉴定,MTT法记录细胞周期,符合MSCs特点,该细胞可定向培养分化为成骨细胞及脂肪样细胞,说明其具有MSCs的定向分化特性。2、根据重物坠落法原理,参照Allen方法成功制备大鼠脊髓损伤模型,行为学评价及病理切片证实模型建立成功。3、为脊髓损伤大鼠模型静脉移植MSCs,4周后大鼠运动功能得到部分恢复,表明静脉移植MSCs对损伤脊髓具有保护修复作用,可以促进脊髓功能的恢复。4、体外实验证实在不同诱导液作用下可将MSCs定向诱导分化为神经样细胞,体内实验证实静脉移植的MSCs可迁移到损伤的脊髓组织,并可转化为神经样细胞,表达神经元特异性标物,进一步阐释了MSCs促进损伤脊髓修复的机制,为临床进一步研究MSCs治疗SCI提供有效依据。
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