小叶黄杨指纹图谱及质量控制研究

来源 :贵阳中医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:heermeisi
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目的:小叶黄杨收载于《贵州省中药材、民族药材质量标准》(2003年版)中,标准仅有该药材的性状和理化鉴别项,为了保证小叶黄杨及相关制剂的临床用药有效、安全和可控,本论文将对小叶黄杨进行指纹图谱及质量控制方法研究,从而提升其质量标准。  方法:1.采用HPLC法建立小叶黄杨指纹图谱,利用相似度软件和SPSS软件对17批药材指纹图谱数据进行分析。2.采用感官检查法对小叶黄杨性状及显微特征进行观察,采用薄层色谱(TLC)法对小叶黄杨中环维黄杨星D、紫丁香苷和香草酸进行定性研究。3.参照《中国药典》2015年版四部中的方法,对小叶黄杨中的水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物进行测定,采用原子吸收分光光度(AAS)法和原子荧光分光光度(AFS)法测定该药材中铅(Pb)、镉(Cd)、铜(Cu)、砷(As)、汞(Hg)的含量。4.采用高效液相色谱电喷雾检测器(HPLC-CAD)法测定小叶黄杨不同部位中环维黄杨星D的含量,采用高效液相色谱二级管阵列检测器(HPLC-DAD)法测定小叶黄杨不同部位中紫丁香苷和香草酸的含量。  结果:1.建立了小叶黄杨药材的HPLC指纹图谱,标定了23个共有峰,并通过对照品比对试验,指认了6个共有峰,17批药材的相似度在0.789~0.990之间。2.对小叶黄杨的性状、显微特征进行了描述,TLC法操作简便,准确,斑点清晰,专属性好。3.水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物的含量分别在8.29%~11.81%、3.07%~5.05%、0.27%~0.81%、18.40%~28.17%范围内,AAS法和AFS法中,Pb、Cd、Cu、As、Hg5种元素在检测浓度范围内线性关系良好(r均不低于0.995),检出限分别为0.040、0.0031、0.91、0.0070、0.0029mg/kg,Pb3种浓度水品平均加样回收率分别为82.6%(RSD=0.84%)、88.8%(RSD=2.3%)、85.7%(RSD=1.7%),Cd3种浓度水品平均加样回收率分别为94.5%(RSD=5.3%)、95.4%(RSD=0.53%)、81.1%(RSD=0.68%),Cu3种浓度水品平均加样回收率分别为103.5%(RSD=2.3%)、104.9%(RSD=0.8%)、102.0%(RSD=1.8%),As3种浓度水品平均加样回收率分别为87.6%(RSD=4.2%)、88.2%(RSD=2.2%)、90.3%(RSD=4.7%),Hg3种浓度水品平均加样回收率分别为98.4%(RSD=5.6%)、107%(RSD=4.3%)、102%(RSD=3.1%)。4.HPLC-CAD法和HPLC-DAD法中环维黄杨星D、紫丁香苷、香草酸质量浓度分别在5.092~203.7、3.36~302.4、0.55~695.5μg/mL(r=0.9995)范围内线性关系良好,检出限分别为1.02、0.07、0.03μg/mL,环维黄杨星D3种浓度水品平均加样回收率分别为97.6%(RSD=2.7%)、97.4%(RSD=1.3%)、97.6%(RSD=3.0%),紫丁香苷3种浓度水品平均加样回收率分别为103%(RSD=3.0%)、101%(RSD=3.7%)、99.8%(RSD=1.5%),香草酸3种浓度水品平均加样回收率分别为99.1%(RSD=1.6%)、101%(RSD=1.1%)、98.4%(RSD=0.41%)。粗茎、细枝以及叶中环维黄杨星D的平均含量分别为0.153mg/g、0.073mg/g、0.036mg/g,紫丁香苷平均含量分别为0.037mg/g、0.197mg/g、0.393mg/g,香草酸平均含量分别为0.052mg/g、0.059mg/g、0.046mg/g。  结论:本论文建立的HPLC指纹图谱,分析方法简便、灵敏度高,17批小叶黄杨的化学成分相似,含量差异较大;TLC方法可用于鉴别小叶黄杨;AAS法和AFS法测定结果可行、准确可靠、灵敏简便;HPLC-CAD法,具有检出限低、灵敏度高、选择范围广的特点,对于无紫外吸收的样品尤为适宜;HPLC-DAD法能准确测定紫丁香苷和香草酸的含量。上述实验结果说明本论文建立的方法重现性好、适用性较强,可以控制小叶黄杨的质量,为开发利用其资源提供了科学依据。
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