论文部分内容阅读
以野生种百合卷丹、渥丹及东方百合杂种系品种索蚌为试材，对百合离体再生体系进行研究，并以秋水仙素为诱变剂，利用浸泡法、组培加倍法对百合染色体进行加倍处理，建立了有效的加倍方法体系，得到卷丹1个加倍株系、渥丹8个加倍株系。研究结果如下：
通过本试验研究，得到了适合百合外植体消毒、诱导、增殖及生根培养的方法和最佳培养基，建立了百合离体再生体系。卷丹百合鳞片外植体最适宜消毒时间是70％酒精10s、0.1％HgCl215min，成活率55.6％；卷丹珠芽最适宜消毒时间是70％酒精10s、0.1％HgCl210min，成活率60.5％；渥丹种子用70％酒精表面消毒30s即可收到较好的效果，成活率高达95.0％；索蚌鳞片最适合消毒时间是70％酒精30s、0.1％HgCl215min，成活率最高，60.0％。卷丹百合鳞片、珠芽外植体的最佳诱导培养基为MS+6-BA1.5mg·L-1+NAA0.2mg·L-1，诱导率86.7％；渥丹种子最佳萌发培养基为1/2MS，种子出芽率37.3％；索蚌最佳诱导培养基为MS+BA1.5mg·L-1+NAA0.2mg·L-1，诱导率97.5％。卷丹最佳增殖培养基为MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.2mg·L-1，增殖系数8.0；渥丹最佳增殖培养基为MS+6-BA0.5mg·L-1+NAA0.5mg·L-1增殖系数5.0，同时生根5～7条，根长可达4.0cm；索蚌最佳增殖培养基为MS+BA2.0mg·L-1+NAA0.2mg·L-1，增殖系数8.0。卷丹最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg·L-1，生根率100.0％，平均生根4.5条；索蚌最佳生根培养基为MS+BA1.0mg·L-1+NAA1.0mg·L-1，生根率100.0％，生根8～10条。
利用秋水仙素作为诱变剂对百合多倍体诱导进行了研究，结果表明：采用浸泡法对百合鳞片、珠芽、种子及无菌试管苗进行处理，虽然处理方法简单，易于操作，但成功率低，没有获得成活的加倍株系；组织培养法与秋水仙素加倍处理相结合可显著提高加倍成功率。
采用秋水仙素浸泡处理法时，秋水仙素不同处理浓度、不同处理时间对百合外植体的处理效果不同，250mg·L-1秋水仙素溶液直接浸泡渥丹种子72h，胚轴变粗率最高，92.9％，处理后的种子移栽未萌发。秋水仙素直接浸泡卷丹鳞片和珠芽，再生的小鳞茎未表现出加倍特征，直接浸泡的卷丹珠芽根尖钝圆，但移栽后全部致死。100mg·L-1秋水仙素溶液直接浸泡渥丹试管苗48h，E值最高，0.467；200mg·L-1秋水仙素溶液直接浸泡索蚌试管苗24h，E值最高，0.466。但继续培养二者均未得到成活株系。采用秋水仙素组培法，共处理渥丹种子1116粒，萌发499粒，用150mg·L-1秋水仙素溶液，处理20d，E值最高，0.51。最后获得77个成活株系，36个株系具有加倍形态特征。共处理卷丹试管苗450株，适宜的秋水仙素浓度为150mg·L-1，处理20d，形态变化率最高，37.5％，获得1个愈伤组织成苗株系。共处理索蚌试管苗450株，适宜的秋水仙素浓度为250mg·L-1，处理30d，形态变化率最高，87.5％，获得1个成活株系。
从36个具有加倍特征的渥丹株系中抽取8个株系进行染色体鉴定，均为加倍株系(2n=4x=48)，卷丹1个加倍株系(2n=6x=72)，索蚌株系未加倍(2n=2x=24)。加倍植株形态上表现为：植株生长缓慢，变矮，叶片变宽、肥厚，叶色变深，容易玻璃化和出现扭曲现象。