嗜酸乳杆菌对健康及口蹄疫疫苗接种小鼠的免疫调节作用

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益生菌通过抑制或增强对细胞因子表达的调节影响肠道免疫反应。研究表明,口服嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus SW1(LASW1)具有免疫增强作用,能增强病毒特异性免疫反应,动物以口服方式摄取该菌株后,能够调节体内细胞因子的表达水平。在本研究中,首先评估了LASW1对健康BALB/c小鼠全身性免疫反应的影响。结果表明饲喂LASW1后,与对照组相比,小鼠体内肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达受到显著抑制,而Th1型细胞因子,包括干扰素-gamma(IFN-γ)和白细胞介素12(IL-12)的表达明显升高。实验还发现,口服LASW1后,小鼠体内转化生长因子(TGF-β)的水平也明显升高。此外,高剂量LASW1与低剂量LASW1分别饲喂小鼠,与对照组相比,外周血中CD3+CD4+和CD3+CD8+T细胞数量随之降低。同时发现,小鼠血清中免疫球蛋白的浓度也发生了明显的变化,并且这种变化呈菌株剂量依赖性。与体内试验相比,热致死型(heat-killed,HK)LASW1(HKLASW1)能诱导脾脏细胞大量分泌TNF-a,而细菌培养上清液(La-sup)能强烈的抑制HKLASAW1诱导后脾脏淋巴细胞产生的TNF-α量,但能增强TGF-β的产生。实验还证实La-sup也能引起脾脏淋巴细胞中调节性T细胞比例的增加。这些结果说明,LASW1对健康小鼠具有深远的免疫调节作用,且这种调节作用呈剂量依赖性。实验数据提示,LASW1诱导的免疫调节机制可能以依赖调节性T细胞的方式进行,LASW1分泌因子在其免疫调节过程中可能发挥着重要的作用。其次,研究了益生素调节特异性细胞免疫反应和体液免疫反应的功能。以小鼠为实验动物,设计了一项志在探讨LASW1对商用口蹄疫疫苗免疫反应的影响。30只小鼠随机分成三组,每组10只。小鼠接种口蹄疫疫苗后,一组小鼠连续饲喂5天LASW1,每次每天2-5×109CFU菌量。数周后,采血分离血清,检测其中特异性IgG及其亚型的含量,同时检测血清中细胞因子的变化。此外,免疫14天后,分别检测了ConA诱导的T细胞增殖反应、146S抗原的超敏反应(DTH)以及脾脏淋巴细胞分泌的细胞因子水平。结果表明,小鼠血清中产生了较高水平的IFN-γ和TNF-α。与单独免疫口蹄疫疫苗的对照组相比,血清中总IgG水平没有明显变化,但IgG1水平下降,而IgG2a水平上升。另外,口服LASW1也能增强DTH反应、ConA诱导的淋巴细胞增殖;当用146S抗原和LASW1共同刺激脾脏细胞时,与对照组相比,细胞上清液中IFN-γ和TNF-α的量明显增加。这些数据提示,LASW1可能会增强口蹄疫疫苗的Th1型免疫反应,也具有增强体液与细胞免疫反应的潜能。结果提示,LASW1可作为一种潜在口服调节剂或佐剂,改善口蹄疫疫苗引起的免疫反应。最后,探讨了嗜酸乳杆菌是对口蹄疫DNA疫苗的免疫增强作用。以BALB/c小鼠为实验动物,通过检测特异性抗体反应、T细胞增殖以及细胞因子分泌等指标,观察了嗜酸乳杆菌SW1株对DNA疫苗(pRC/CMV-vp1)免疫反应的影响。实验结果表明,嗜酸乳杆菌SW1株能增强口蹄疫病毒特异性免疫反应。与对照组相比,嗜酸乳杆菌SW1株明显的增强了pRC/CMV-vp1引起的口蹄疫病毒特异性抗体滴度。T细胞增殖实验表明,口服嗜酸乳杆菌SW1小鼠的脾脏细胞,经ConA和146S刺激后,细胞增殖的刺激指数值明显高于对照组。此外,实验还发现,受特异性抗原刺激后,口服嗜酸乳杆菌SW1小鼠脾脏细胞产生的IFN-γ浓度以及脾脏淋巴细胞中IFN-γ分泌性细胞数量明显增加,提示IFN-γ在嗜酸乳杆菌SW1对pRC/CMV-vp1的佐剂效应中,可能起着重要的作用。实验结果表明,嗜酸乳杆菌SW1株是口蹄疫DNA疫苗极具潜力的候选口服免疫增强剂。
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