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目的：探讨中药益气清热膏对嘌呤霉素氨基核苷(Puromycin aminonucleoside PAN)肾病大鼠肾小球滤过屏障功能的影响及其降低尿蛋白的机制。方法：将雄性Sprague-Dawley大鼠48只随机分为4组：即假手术组、PAN模型组、益气清热膏组、蒙诺组；各组大鼠单次左侧颈静脉插管注射嘌呤霉素氨基核苷(40mg/kg体重)造模,假手术组予等量生理盐水。分别在造模前1天与造模后的第3天、第5天、第10天收集大鼠24h尿,检测大鼠24h尿中的蛋白含量。在造模后的第3天、10天分批次处死大鼠,每组6只,腹主动脉取血,测量大鼠血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、肌酐(CREA)、尿素氮(BUN)、胆固醇(CHO)及甘油三酯(TG)水平。取肾脏组织,应用光镜、电镜观察肾脏病理改变,RT-PCR法检测大鼠肾组织中nephrin、podocin、CD2AP及VEGF-A mRNA的表达,Western blot法检测肾组织中podocin、CD2AP与VEGF蛋白的表达。免疫组织化学方法检测nephrin蛋白表达的改变。结果：1益气清热膏能降低大鼠24h尿蛋白：在造模后的第3天,各组大鼠均未出现尿蛋白(P>0.05)：在造模后的第5天(P>0.05),除假手术组外,各组均出现大量尿蛋白(P<0.01),但各组间无明显差异；在造模后第10天,益气清热膏组与蒙诺组均能显著降低大鼠24h尿蛋白(P<0.05)。2益气清热膏对大鼠血清学指标的影响：在造模后的第3天,各组大鼠血清学指标均无差异；在造模后的第10天,益气清热膏与蒙诺均可改善大鼠的血脂紊乱,提高大鼠血清中白蛋白与总蛋白的含量。3光镜与电镜结果显示：在造模后的第3天,与假手术组相比,光镜下模型组、益气清热膏组与蒙诺组肾组织病理损伤不明显,而电镜下模型组、益气清热膏组与蒙诺组肾小球滤过屏障结构损伤程度重,三组之间无明显差异。在造模后的第10天,与模型组比较,在光镜与电镜下可见益气清热膏与蒙诺可明显减轻肾组织病理损伤。4分子生物学结果显示：Western blot与免疫组织化学结果显示,在造模后的第3天,与假手术比较,模型组肾组织中nephrin、podocin与CD2AP蛋白的表达减少,而血管内皮生长因子VEGF蛋白表达增加,益气清热膏可上调nephrin、podocin与CD2AP蛋白的表达(P<0.05),益气清热膏与蒙诺均对VEGF蛋白的表达有明显的抑制作用(P<0.05)。在造模后的第10天,与假手术组相比,模型组肾组织蛋白中nephrin、podocin与CD2AP表达减少,VEGF表达增加,益气清热膏组可上调滤nephrin、podocin与CD2AP蛋白表达(P<0.05),益气清热膏与蒙诺均能抑制VEGF蛋白的表达(P<0.05)。RT-PGR结果显示：在造模后的第3天,与假手术组相比,nephrin、podocin与CD2AP的mRNA水平无明显变化,血管内皮生长因子VEGF-A的mRNA表达升高,尤其以VEGF164的升高最为显著,益气清热膏对VEGF-A mRNA的表达有明显的抑制作用(P<0.05)。在造模后的第10天,与假手术组相比,模型组肾组织中nephrin、podocin与CD2AP的mRNA水平升高,而益气清热膏与蒙诺组有抑制其表达升高的作用(P<0.05),与造模后第3天相比,血管内皮生长因子VEGF-A的mRNA表达在各组均升高,中药益气清热膏与蒙诺能抑制其升高的作用。结论：1.益气清热膏具有降低PAN模型大鼠尿蛋白、改善大鼠的血脂紊乱,提高大鼠血清中白蛋白与总蛋白含量的作用,有效改善肾脏病理损伤,其机制可能是通过上调肾组织中nephrin、podocin及CD2AP的蛋白表达,抑制VEGF的蛋白表达,维持足细胞裂孔隔膜与内皮窗孔的完整性,从而减轻肾小球滤过屏障的损伤。2.在PAN肾病模型中,在造模后的第3天还未出蛋白尿时,肾小球滤过屏障的结构就明显被破坏,与假手术组比较,模型组血管内皮生长因子VEGF的mRNA表达升高,早于nephrin、podocin与CD2AP mRNA的变化。