线虫作为一种重要的模式生物，具有结构简单，生命周期短，繁殖能力强等特点而被用于神经生物学研究。其神经系统结构简单，可分为运动神经元、感觉神经元、中间神经元等几大类。线虫神经功能研究中，通常进行特异性表达或标记神经元以进行针对性的研究。然而，线虫中能被特异性标记的神经元和标记方法都较少，且需要繁复的人力劳动进行载体构建。本研究以解决这些问题为基本出发点。本研究将线虫单神经元表达的启动子构建成Multisite Gateway体系的第一个入门克隆形式，以便于高效准确的进行表达克隆构建。在进行大片段DNA序列的BP反应时，效率不高，但经济成本高昂。为解决这个问题，引进In-fusion技术，将神经元特异性表达的启动子构建形成入门克隆库。如此，单神经元特异性表达启动子便可以与任意基因组合构建表达载体，实现了较强的通用性。通过连接破伤风杆菌神经毒素TeTx、线虫基因、荧光蛋白等基因组成表达载体的方法，对这些启动子进行了表达验证，同时对标记相同神经元的启动子进行了比较。然而，线虫中能被单启动子驱动特异性表达标记的神经元数量有限，被证实不足20个。运用位点特异性重组酶Flp/Frt、Cre/LoxP系统结合Gateway技术可实现多启动子重叠表达神经元的标记。为实现多顺反子在线虫相同组织同时表达，线虫中第二种反式剪接的splicedleader（SL2）被应用了进来。SL2e连接荧光蛋白，对其介导的多顺反子表达效果进行了激光扫描共聚焦成像分析。建立的这套神经元特异性表达体系可便捷地应用于线虫神经功能的分子机制研究研究，包括神经功能回复，神经功能丧失及神经元钙信号记录等实验。