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目的:探讨PTTG1(垂体肿瘤转化基因1)对人子宫内膜癌ISK细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法:1.细胞培养:常规对人子宫内膜癌ISK细胞进行细胞复苏、细胞换液、细胞传代、细胞冻存、细胞计数等处理。2.构建3条靶向PTTG1基因的shRNA干扰质粒(PTTG1-homo-509;PTTG1-homo-922;PTTG1-homo-596)。3.在lipo2000作用下瞬时转染靶向PTTG1基因的shRNA干扰质粒至ISK细胞中。4.36h后避光条件下观察瞬时转染结果(荧光显微镜下进行),即观察有绿色荧光表达的细胞所占的比例。5.通过Western blot方法检验PTTG1蛋白在各组中表达差异。6.通过MTT实验检测降表达PTTG1后ISK细胞生长增殖活性的变化。7.通过Transwell小室实验检测下调PTTG1后ISK迁移及侵袭力的变化差异。结果:1.瞬转ISK细胞36h后,荧光显微镜下观测到有绿色荧光表达的细胞数量占75%以上,表明瞬转实验成功。2.Western blot实验检测到干扰组-509、干扰组-922、干扰组-596中的PTTG1与内参β-actin灰度值比值均明显小于正常组及阴性对照组,且差异明显有统计学意义(P<0.05)。这就说明3个干扰组中的PTTG1蛋白表达均受到了明显抑制,即构建的3条靶向PTTG1基因的shRNA干扰质粒均有效。3.在MTT实验中,干扰组(转染了有效PTTG1 shRNA质粒的细胞)中在各时间段的OD值均小于正常组及阴性对照组,说明干扰组中细胞增长较两个对照组明显减慢,差异且存在统计学意义(P<0.05)。4.在Transwell小室实验中,干扰组(转染了有效PTTG1 shRNA质粒的细胞)中的穿膜细胞数较正常及阴性对照组明显减少,说明该组细胞的迁移及侵袭能力较以上两组细胞明显减弱,且差异明显有统计学意义(P<0.05)。结论:1.PTTG1 sh RNA干扰质粒可使人子宫内膜癌ISK细胞中的PTTG1蛋白表达量明显降低并可抑制ISK细胞的增殖、迁移及侵袭力。2.PTTG1在子宫内膜癌的发生发展过程中起到了重要作用。