耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子流行病学研究

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目的:用脉冲场凝胶电泳(Pulsed Field Gel Electrophoresis, PFGE)及多重PCR技术对天津市南开医院临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)株进行染色体指纹图谱分析和葡萄球菌染色体mec基因盒(Staphylococcal Cassette Chromosome mec, SCCmec)基因分型,以了解该院院内感染MRSA菌株的流行特征。方法:(1)临床送检标本按常规方法初步鉴定为葡萄球菌属,然后根据血浆凝固酶及生化反应的结果鉴定金黄色葡萄球菌,再进行头孢西丁药敏试验,确定MRSA,质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC25923。(2)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌药物敏感试验采用K—B纸片扩散法,测试其对14种抗菌药物的敏感性,药敏结果按NCCLS(2004年版)的标准判读。(3)对40株MRSA进行PFGE分析、mecA基因检测及SCCmec基因分型。结果:(1)菌株来源:40株MRSA中28株来源于痰液,占70%;来自腹水或腹腔引流液的7株(17.5%);伤口引流液和血液各2株(5.0%);咽拭子1株(2.5%)。(2) SCCmec分型:Oliveira法和Zhang法将40株MRSA分为四个型别,Ⅲ型为主,共33株,占82.5%;V型5株(12.5%);Ⅰ型和Ⅳ型均为1株(2.5%)。(3) PFGE分型:40株MRSA可被分为A—E五个型别,其中A型21株,52.5%;B型8株(20.0%);C型4株(10.0%);D型6株(15.0%);E型]株(2.5%)。(4) PFGE各型别与耐药谱:除对共同的5种抗生素(克林霉素、红霉素、头孢西丁、苯唑西林、青霉素)耐药外,各型还另对其他种类的药物耐药,如A型对6种,B型对2种,C型对4种,D型对5种,E型对4种药物耐药。(5)通过分析不同PFGE型别的院内感染MRSA菌株的时间和空间分布,可清晰地追溯各型菌株在该院的分布和传播情况。结论:(1)本研究所用菌株来源于住院患者的不同感染部位,但痰液的MRSA检出率最高,这显然与呼吸道为葡萄球菌的主要定植部位有关。(2)在07至08两年的时间里,仅收集到40株院内感染MRSA,这40株菌又分属于A-E五个PFGE型别,说明天津市南开医院住院患者所感染的MRSA不是来自同一克隆株,故呈散发流行。(3)所有40株MRSA菌株均为多重耐药,但表现出各PFGE型菌株共有耐药性和型相关性耐药表型;这种耐药谱的差别对指导用药有参考意义。(4)本研究所涉及的MRSA菌株,SCCmec分型以Ⅲ型为主,符合院内感染MRSA菌株的特征。PFGE分型和SCCmec分型分别从不同方面研究这组MRSA菌株,通过综合两方面的研究结果,可在分子水平对医院内分离到的MRSA菌株进行分析,从而确定相关院内感染病原菌的遗传学特征、感染来源、传播途径及分布规律,为院内感染的监控提供可靠的依据。
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