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本研究经筛选研究的基础上,主要对荷花粉和金针菇的样品细胞内的还原型谷胱甘肽(GSH)和含有半胱氨酸残基的巯基化物的含量进行检测,意在筛选出富含GSH和巯基化合物的药食两用植物类样品。据文献报道：人体内含半胱氨酸残基的巯基化合物含量的高低与人体的衰老和某些特殊的疾病有着密不可分的联系。因此,通过筛选富含GSH及巯基化合物的药食兼用的食品,对于人类的治病、防病、延年益寿具有实际意义。尽管,生物样品中巯基化合物的测定有多种不同的方法,但是由于这些方法采用不同的前处理过程,这导致了不同测定方法间存在较大的差异。本研究利用高效液相色谱法和光谱法对三种不同前处理方法得到的样品提取液进行对比,发现采用细胞破壁、衍生化为一体的同步前处理方法,测得的分析信号强度最大,尽可能地避免了前处理过程中细胞内的(-SH)因胞外氧化环境导致的氧化变性,使得测定的结果更加实时、可靠地反映了生物细胞内的含量。同时,本研究也采用了两种不同测定方法分别对生物样品中GSH和总巯基(-SH)的含量进行测定,结果显示,所测样品中GSH和总巯基(-SH)的含量基本吻合,这充分说明了本研究所选择的高效液相色谱法以及光谱法对所选生物样品中巯基化合物检测的可靠性。本研究还同时利用荷花粉作为活细胞样本探讨了不同重金属离子胁迫时,细胞内的GSH和含巯基蛋白质的应答作用,为巯基化合物对重金属解毒机制的研究提供了基础数据。HPLC法测定荷花粉中还原型谷胱甘肽GSH和总巯基(-SH)的含量利用过量衍生化试剂DTNB的提取液,采用细胞破壁、衍生化为一体的同步前处理方法,对荷花粉中GSH和总巯基(-SH)的含量进行高效液相色谱测定。测定结果显示：荷花粉中GSH和总巯基(-SH)的含量分别为2.0865μmol/g和9.5076μmol/g,但因荷花粉样品中不含有类似于半胱氨酸(Cys)一样的其他小分子巯基化合物,因此总巯基(-SH)和GSH含量的差值7.4211 μmol/g,即为荷花粉中蛋白质巯基(Prot.SH)的含量。方法的回收率为100.95%和99.91%,其检测限分别为518μmol/L和6.22 μmol/L光谱法测定荷花粉中GSH和总巯基(-SH)的含量本研究采用衍生化试剂5,5-二硫双-2-硝基苯甲酸(DTNB)和邻苯二甲醛(OPA)对荷花粉中总巯基(-SH)和GSH含量分别进行了紫外光谱和荧光光谱的测定。荷花粉中GSH的含量为18007μmol/g；总巯基(-SH)的含量为9.6829mol/g.光谱法测定的结果与HPLC法测定结果相比较,可以发现两者结果相差不大,基本吻合。可以证明两种方法的可靠性。不同重金属浸泡下荷花粉细胞内巯基化合物的应答机制研究本研究采用高效液相色谱法测定不同重金属浸泡下荷花粉中GSH和巯基蛋白质(P-SH)的含量的变化,以及采用ICP-MS法对不同重金属浸泡后荷花粉中重金属含量进行测定。初步探讨不同重金属浸泡下胞内巯基化合物的应答机制,为生物细胞对重金属解毒和积累机制的研究提供数据上的参考。金针菇中谷胱甘肽(GSH)和总巯基(-SH)含量的测定利用光谱法和高效液相色谱法分别对金针菇中GSH和总巯基(-SH)含量的进行了测定,测定结果表明：HPLC法测得的金针菇中GSH和总巯基的含量分别为1.3665μmol/g和1.6366μmol/g,光谱法测得的GSH和总巯基的含量分别为1.34291μmol/g和1.6296μmol/g.光谱法测定的回收率为100.42%和100.19%其检测限分别为0.1177μmol/L和0.2194μmol/L,HPLC法测定的回收率为100.92%和100.06%,其检测限分别为518μmol/L和6.22μmol/L,两种方法的回收率与检测限都能达到本实验对于灵敏度与准确度的要求。