粒细胞集落刺激因子对阿霉素致大鼠心肌氧化应激的影响

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目的:研究粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对阿霉素(ADM)所致大鼠心肌氧化应激的影响。方法:40只SD大鼠随机分成5组:对照组、ADM组、ADM+G-CSF(Ⅰ)组、ADM+G-CSF(Ⅱ)组、ADM+G-CSF(Ⅲ)组。ADM、G-CSF用无菌生理盐水溶解。ADM给药采用等容积(10.0ml·kg-1)腹腔注射(ip),G-CSF给药采用等容积(1.0ml·kg-1)皮下注射(sc)。对照组:首次分别ip和sc无菌生理盐水10.0ml·kg-1、1.0ml·kg-1,以后每天sc无菌生理盐水1.0ml·kg-1 1次,共2次。ADM组:ip ADM(10.0mg·kg-1)1次,同时sc无菌生理盐水(1.0ml·kg-1)1次,以后每天sc无菌生理盐水1.0ml·kg-1 1次,共2次。ADM+G-CSF(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ)3组:ADM给药的剂量及用法同ADM组;G-CSF给药为sc G-CSF〔G-CSF在ADM+G-CSF(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ)3组的剂量分别为15.0、30.0、60.0μg·kg-1,每天1次,共3次〕,G-CSF的首次给药为ip ADM的同时sc G-CSF。于给药后第72小时处死所有大鼠。用分光光度法测定心肌组织的丙二醛(MDA)含量、一氧化氮(NO)含量、过氧化氢(H2O2)含量、羟自由基(OH·)含量、超氧阴离子(O2.-)含量、铜锌超氧化物歧化酶(Cu-Zn SOD)活性、锰超氧化物歧化酶(Mn SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性、结构型一氧化氮合酶(cNOS)活性、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性及血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性;用酶免疫吸附测定(ELISA )法测定心肌组织的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量、过氧亚硝基阴离子标志物—硝基酪氨酸(NT)含量;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测心肌组织的Cu-Zn SOD mRNA、Mn SOD mRNA、GPx mRNA、iNOS mRNA、TNF-αmRNA表达。结果:ADM组心肌组织的iNOS mRNA表达水平、TNF-αmRNA表达水平、iNOS活性、NO含量、MDA含量、H2O2含量、OH·含量、O2.-含量、TNF-α含量、NT含量及血清CK-MB的活性明显高于对照组(P<0.01),心肌组织的Cu-Zn SODmRNA、Mn SODmRNA、GPxmRNA表达水平及Cu-Zn SOD、Mn SOD、GPx活性明显低于对照组(P<0.01),心肌组织的cNOS活性与对照组差异无显著性(P>0.05);ADM+G-CSF(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ)3组心肌组织iNOS mRNA表达水平、TNF-αmRNA表达水平、iNOS活性、NO含量、MDA含量、H2O2含量、OH·含量、O2.-含量、TNF-α含量、NT含量及血清CK-MB活性明显低于ADM组(P<0.01),心肌组织的Cu-Zn SOD mRNA、Mn SOD mRNA、GPx mRNA表达水平及Cu-Zn SOD、Mn SOD、GPx活性明显高于ADM组(P<0.01),心肌组织的cNOS活性与ADM组差异无显著性(P>0.05)。结论:G-CSF抑制ADM导致心肌氧化应激。G-CSF抑制ADM导致心肌氧化应激与G-CSF拮抗ADM抑制心肌组织的Cu-Zn SOD mRNA、Mn SOD mRNA、GPx mRNA表达而拮抗ADM抑制Cu-Zn SOD、Mn SOD、GPx的活性,以及G-CSF抑制ADM诱导心肌组织的iNOS mRNA表达而降低iNOS活性,从而使心肌组织产生O2.-、H2O2、OH·、过氧亚硝基阴离子减少有关。
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