【摘 要】
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真核生物细胞核中具有三种不同的RNA聚合酶,分别是RNA聚合酶Ⅰ、RNA聚合酶Ⅱ和RNA聚合酶Ⅲ.RNA聚合酶Ⅰ负责催化生成5.8S、18S和28SrRNA,RNA聚合酶Ⅱ负责mRNA的转录合成,而RN
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真核生物细胞核中具有三种不同的RNA聚合酶,分别是RNA聚合酶Ⅰ、RNA聚合酶Ⅱ和RNA聚合酶Ⅲ.RNA聚合酶Ⅰ负责催化生成5.8S、18S和28SrRNA,RNA聚合酶Ⅱ负责mRNA的转录合成,而RNA聚合酶Ⅲ则负责催化5SrRNA、tRNA、多数的snRNA以及某些病毒基因(如VA基因)的转录.从上个世纪六十年代开始人们就通过放射自显影、免疫标记结合细胞化学染色的方法对这三种RNA聚合酶在细胞核中的转录位点进行了研究.研究结果显示:RNA聚合酶Ⅰ的转录发生在核仁内,RNA聚合酶Ⅱ和RNA聚合酶Ⅲ的转录发生在核质中.由于RNA聚合酶Ⅲ转录位点的研究存在特殊性,而传统的研究方法又存在一定的局限性,因此近几年人们对RNA聚合酶Ⅲ的转录发生在核质中这一结论提出了质疑,但至今尚缺乏直接的实验证据.该研究以中国仓鼠卵巢细胞株(CHO)为材料,利用基因转染、荧光原位杂交结合激光共聚焦显微镜观察,对RNA聚合酶Ⅲ的转录位点和转录子分布进行了研究.结果表明RNA聚合酶Ⅲ的转录位点发生在核仁及其周边区域.同时,应用这一研究方法对RNA聚合酶Ⅰ的转录发生在核仁中的结论进行了确证,并进而应用双探针标记荧光原位杂交的方法对RNA聚合酶Ⅲ和RNA聚合酶Ⅰ转录位点的关系进行了初步探讨,结果显示两者的转录位点之间非常接近,并且有伴随发生的趋势.该实验突破了RNA聚合酶Ⅲ转录发生在核质中这一传统观点,同时得出了RNA聚合酶Ⅲ和RNA聚合酶Ⅰ的转录位点非常接近、可能相伴发生这一结论.研究结果对于人们进一步了解RNA聚合酶Ⅲ的转录机制、加工和运输过程及RNA聚合酶之间的结构与功能关系等均具有重要的意义.
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