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枯草芽孢杆菌D-29是从地肤体内分离得到的内生细菌,对玉米大斑病菌、番茄灰霉病菌、褐腐病菌等多种植物病原真菌具有良好的抑制效果。本文对D-29菌株固态发酵、制剂研制、生防效果进行了研究,结果如下:1.采用正交实验方法,以D-29芽孢量为指标,筛选了D-29固态发酵培养基,优化后配方为:麦麸:稻壳:玉米粉:豆粕=12:3:1:3,含水量60%。发酵条件为:接种量12%,10g干基质/250mL锥形瓶,温度32℃,pH为7.0,发酵时间72h。优化后,D-29固态发酵芽孢量可达1.64×1011cfu/g。2.在固态发酵的基础上制备D-29发酵滤液,筛选助剂制备D-29可湿性粉剂。通过对8种载体、23种助剂的筛选,最后得到D-29可湿性粉剂配方为:蛭石粉为载体吸附D-29发酵滤液制备母粉,母粉91.0%,润湿剂95004.8%,分散剂FM-63.2%,紫外保护剂SDS1.0%。D-29可湿性粉剂茅孢量可达1.5×1010cfu/g,杂菌率0%,pH7.2,细度98.1%,干燥减量1.5%,润湿时间48.0s,悬浮率93.7%,对植物安全,符合国家标准。3.枯草芽孢杆菌D-29可湿性粉剂103倍稀释液可以提高番茄种子萌发率,显著促进番茄种子根和芽的生长;浇灌番茄植株可以促进株高、茎粗和干重的增长,但与对照相比效果不显著。苹果经D-29可湿性粉剂103倍稀释液浸果后,在4℃贮藏90d和25℃贮藏35d发病率分别为5.5%和33.3%,失水率分别为3.5%和5.7%,对照发病率分别为44.4%和52.4%,失水率分别为3.5%和7.1%。D-29可湿性粉剂103倍稀释液对无伤接种的苹果褐腐病和苹果炭疽病24d防效分别为87.5%和61.5%。