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金针菇菌瘤病是一类新型的食用菌细菌性病害,危害极大,严重时可使80%以上栽培袋侵染,导致原基形成受阻,造成严重的经济损失和产业影响。2010年,该类病害最先在中国四川红原、夹金山、松潘等反季节栽培地区发现。此后,在四川、河南、湖北等地的工厂化栽培中也有出现。目前,关于该类病害未曾有相关的描述及病原菌的报道,其防治措施更是缺乏。因此,本研究分别在四川红原、松潘等地金针菇菌瘤高发区采集7份样本,对该病害进行了病原物分离鉴定,通过形态鉴定、生理生化特征及分子生物学技术确定了病原菌,筛选出抗病菌株和抑菌药剂,探究病原菌对其它食药用菌的影响等研究。主要研究结果如下:1.金针菇菌瘤病的描述及病原物的分离。本研究采取田间观察、实验室接种的方式记录金针菇菌瘤病的发生及发展情况,发现存在两种症状相似的病害,分别命名为“金针菇菌瘤病Ⅰ型”和“金针菇菌瘤病Ⅱ型”。Ⅰ型菌瘤排列致密,表面的颗粒体较小,菌瘤颜色较Ⅱ型深,有褐色液体产生,Ⅱ型菌瘤呈黄白色,有乳白色液体产生。采用NA培养基和PDA培养基对7份病样的培养基质表面菌瘤、病健交界处的栽培基质及内部栽培基质三个部位分别进行细菌和真菌的分离,共得到68株细菌和29株真菌。不同部位的细菌数目表现为:菌瘤>病健交界处>基质,29株真菌中有21株为金针菇菌丝。8株真菌杂菌仅分布于菌瘤和病健交界处,且其菌瘤上的杂菌数目要多于病健交界处。2.金针菇菌瘤病病原物致病性检测。以川金3号为供试菌株,将分离得到的68株细菌和8株非金针菇的真菌进行柯赫氏验证。通过两次回接实验确定10株细菌性病原物导致金针菇发病,编号分别为:HY1-4、HY2-1、HY2-7、HY2-9、HY3-5、HY3-7、HY4-4、HY5-3、HY6-1、HY7-2。HY2-1等5株细菌回接后产生了典型的“金针菇菌瘤病Ⅰ型”症状,HY5-3等5株细菌回接后产生典型的“金针菇菌瘤病Ⅱ型”症状;而其它分离所得细菌和真菌均不能导致金针菇发病。3.金针菇菌瘤病病原菌的鉴定。利用菌落形态和分子生物学鉴定方法,确定HY2-1、HY2-7、HY3-7、HY6-1、HY7-25 株菌株为同一种细菌,HY1-4、HY2-9、HY3-5、HY4-4、HY5-3为另一种细菌。同时,我们对这两类病原中代表性菌株HY2-1和HY5-3的生理生化特征进行了分析。结果表明两株菌株均呈米黄色菌落,为革兰氏阴性杆菌,接触酶、氧化酶、均显阳性;发酵型、明胶液化、吲哚实验均显阴性。HY2-1不能利用柠檬酸盐,而HY5-3表现为阳性。16S rRNA基因序列比对表明HY2-1和 HY5-3 分别与 和.grignonense的同源性均达到 100%。4.病原菌相关特性研究。两株病原菌可生长的pH范围均为5～9,均能利用酵母粉和蛋白胨,均能利用乙酸等23种碳源。将两株病原菌回接至平菇、香菇、黑木耳等其它20个食药用菌品种的栽培瓶中,观察发病状况及其程度。结果表明两株病原菌均不能导致其它食药用菌菌丝结瘤,且不影响其正常出菇,显示出高度的寄主专一性。5.抗病菌株和抑菌药剂的筛选。将两株病原菌分别接种到川金3号、银针等14株金针菇栽培瓶中,观察发病状况。将米诺环素等30种药敏纸片分别对两株病原菌进行耐药性分析。结果表明金针菇F21对两株病原菌均有较好的抗病能力,银针对病原HY5-3表现有抗性,对病原HY2-1无抗性,其余12株金针菇菌株对两种病原菌均无抗性。米诺环素、氧氟沙星、环丙沙星、复方新诺明4种抗生素对两株病原菌株有较好的抑制作用。本研究首次确定金针菇菌瘤病至少包括两种不同的类型,初步确定为金针菇菌瘤病Ⅰ型和金针菇菌瘤病Ⅱ型,其病原菌分别为O.thiophenivorans和O.pseudogrignonense。病原菌生理生化特性及抑菌药剂的筛选为该类病害的防治提供了理论依据,抗病菌株的筛选为后期育种工作做了准备。