【摘 要】
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CIM(Cytokinin Induced Message)基因属于expansin-B2家族,目前关于CIM基因的研究集中在豆科植物的叶片发育方面。蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)是一年生草本植物,具有生长
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CIM(Cytokinin Induced Message)基因属于expansin-B2家族,目前关于CIM基因的研究集中在豆科植物的叶片发育方面。蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)是一年生草本植物,具有生长速度快,染色体组数量少(2n=16),转基因研究过程中转化效率高等优点,是研究豆科植物遗传学的模式植物。紫花苜蓿(Medicago sativa)因具有高蛋白含量,丰富的维生素和微量元素,产量高等优点,成为人工种植范围最大的牧草之一。本研究旨在探究蒺藜苜蓿CIM基因在紫花苜蓿中表达是否对其叶片发育产生影响。试验以蒺藜苜蓿R108品种为材料,首先在蒺藜苜蓿中克隆出CIM基因,该基因编码区长度为828bp,编码275个氨基酸。而后将该基因连于3302-3flag载体上,构建植物表达载体。将构建的植物表达载体以农杆菌转化的方法导入紫花苜蓿叶片中,通过植物组织培养获得转基因紫花苜蓿植株,观察转基因紫花苜蓿的表型。结果表明转入CIM基因的紫花苜蓿复叶叶片出现发育异常现象,与野生型紫花苜蓿相比,植株相对矮小,叶片呈现梨形,基部的分枝数量增加。同时,本研究进一步完善了紫花苜蓿组织培养体系。
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