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RNAi是最近几年发展起来的研究生物体基因表达调控与功能的一项崭新的基因沉默技术，是由小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）引起的生物细胞内同源基因的特异沉默（silencing）现象，其本质是siRNA与对应的mRNA特异结合，使其降解，从而阻止了mRNA的翻译。植物根癌病世界各地均有发生，在我国也广泛的存在。其病原致瘤农杆菌[Agrobacteriumtume faciens（Smithet Towns）Conn.]对林木、果树、园林花卉等植物均具有广泛的致病性。杨树是我国北方重要的城市绿化和造林树种，是致瘤农杆菌危害林木树种之一。在受到农杆菌侵染后，植株的根部、根茎处甚至茎上形成大小不一的肿瘤，感病植株生长迟缓，树势弱，产量少，寿命短，降低木材产量的同时，也带来了巨大的经济损失。因此采用先进的技术手段，从基因工程的角度来抑制肿瘤发生，研究肿瘤发生机制，这对于植物根癌病的防治、瘿木的开发利用等均具有重要的理论和应用价值。以野生根癌农杆菌Ⅰ型中克隆得到的523bp长度的tml基因为目的基因，利用中间克隆载体pD12，以289bp的pBR322部分序列为间隔区，使tml反义基因片段、PBR322和tml正义基因片段串联，将构成的全长1300bp的DNA片段插入植物双元载体pCAMBIA1302中，成功构建基因tml的RNAi载体pHR2122-1302，此可读框架通过组成型启动子CaMV35S启动，另外此载体带有真核内含子的GFP标记基因，转基因植物可通过荧光鉴定。选用培养基MS+6-BA1.0 mg／L+NAA0.05 mg／L附加蔗糖3％，琼脂0.6％作为毛白杨雄株遗传转化用的芽分化培养基，之后接种到生根培养基1／2MS+IBA0.5mg／L+1.5％蔗糖+6g／L琼脂上利于植株生根。利用野生农杆菌侵染植株，并通过PCR技术对转基因植株插入基因iaaH、tml的检测和对冠瘿碱的检测，确定得到3株野生农杆菌转化植株。通过分析影响遗传转化效率的因素，确立高效遗传转化体系，侵染时间控制在5～10min，共培养2～3天，共培养培养基中去除CoCl2·6H2O，卡那霉素选择压为50mg／L。以根癌农杆菌介导的叶盘转化法将植物双元载体pHR2122-1302转化入毛白杨雄株-D，通过50mg／L卡那霉素筛选和GFP检测，获得了转基因植株，转基因植株在形态上有一定程度的变异，具体数据以及其对外源野生农杆菌的影响正在进一步检测当中。对室外瘤体的研究发现，tml-RNAi载体对瘤生长有一定的影响，初期从生长速度上明显改善了野生农杆菌的生长无序，疯狂生长的状况，从一定程度上减缓了其生长速度，保障了树体的营养供给，但是随时间增长肿瘤又进一步生长，需进一步作详细深入地研究。