甘薯G病毒和地黄花叶病毒外壳蛋白基因对甘薯和地黄遗传转化的研究

来源 :河南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shelley79
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文利用甘薯G病毒(SPVG)的外壳蛋白(CP)基因和地黄花叶病毒(ReMV)的外壳蛋白(CP)基因分别对甘薯和地黄进行了遗传转化。结果表明: (1)利用SPVG CP基因,通过中间载体pROK219将SPVG CP基因克隆到双元植物表达载体pBIN19上,构建了SPVG CP基因的植物表达载体pBSPCP。利用直接冻融转化法将pBSPCP转入土壤农杆菌LBA4404中,在农杆菌的介导下,转化甘薯品种豫薯12号、北京553、SL-19和安平1号,获得了转SPVG CP基因的再生植株。对再生甘薯植株进行了PCR、斑点杂交检测,初步证明获得了甘薯品种北京553的转基因植株。 (2)分别建立了豫薯12号、北京553和SL-19三个甘薯品种的悬浮细胞体系。其中豫薯12号的悬浮细胞体系已经悬浮了6个月,获得了增殖迅速、分散程度良好的胚性细胞悬浮培养系,可以用于遗传转化;北京553、SL-19的悬浮细胞体系已经悬浮了3个月,悬浮细胞多为小细胞团,颗粒较大,胚性细胞居多。利用SPVG CP基因的植物表达载体,在土壤农杆菌介导下转化了悬浮培养120d的豫薯12号的胚性细胞。 (3)以地黄“85-5”无菌苗为材料,对地黄叶片再生系统及其对卡那霉素和羧苄西林钠的天然耐性进行了初步研究。MS+6-BA 2.0 mg·L<-1>+NAA 0.05mg·L<-1>是叶片再生的最适培养基;在地黄遗传转化中,卡那霉素的筛选压和羧苄西林钠的抑菌浓度分别以20mg·L<-1>和400mg·L<-1>为宜。利用地黄花叶病毒外壳蛋白基因的植物表达载体,在土壤农杆菌介导下,对地黄品种“85-5”进行遗传转化,获得了地黄的再生植株。
其他文献
本文以黑斑蛙为材料,从胚胎、幼体(蝌蚪)和成体三个发育阶段,探讨了铬(Ⅵ)暴露所引起的毒性效应。在此基础上,又对铬(Ⅵ)与氯化铁、铬(Ⅵ)与维生素C联合处理后的毒性作用进行了
乳房炎是最常见、防治最难、花费最大的奶牛疾病之一,至今仍无有效的根治手段。本实验室将溶菌酶的广谱抗菌作用与基因治疗原理相结合,将人溶菌酶基因克隆入真核表达载体和乳
学位
摘要:在新一轮课程改革的浪潮中,传统的教育模式受到了极大的质疑和挑战,教师以积极的热情投入到教育改革的洪流中,探索新的教育模式,改革刻不容緩。分层教学在这场改革浪潮中应运而生,笔者所在学校每届有十个班,各班也进行了大胆的尝试。在实践中,我们越来越感觉到:采用“一种标准”对待所有学生,成绩平平、弊端严重,它否认了学生的差异,掩饰了学生的个性,不利于全体学生的全面发展,而面向全体学生进行分层次指导、分
小肠绒毛是机体内增殖最活跃的组织之一,小肠粘膜上皮细胞终身在不断地自我更新,这一过程依赖小肠隐窝中的干细胞的持续增殖、分化取代外层的终末分化细胞来完成。当照射剂量
摘要:高中班主任在班级建设管理中,一定要把学生当作班级及班级管理的主体,建立民主、平等、和谐的师生关系,营造宽松、愉快的学习环境,以发展的眼光看待每位学生,经常用激励的方式调动他们的积极性。对有过失的学生,教师批评要中肯,帮助要热忱。要以理服人,以心感人,努力使自己成为让学生信赖的教师,使学生敢说真心话。  关键词:班级建设管理;教育教学实践;建设和谐班级;享受和谐幸福  中图分类号:G635.1
大豆是世界上重要的经济作物之一。培育高油酸大豆品种是大豆育种的重要方向之一。本研究旨在建立高效大豆子叶节再生体系及其农杆菌介导的反义fad基因转化体系,获得高频率的