新型肺靶向DTX-LP的制备工艺及质量评价体系研究

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背景目前,肺癌的发病率和死亡率已成为各类恶性肿瘤之首,其中非小细胞肺癌(NSCLC)约占80%。临床上,多以手术、放疗和化疗等相结合的方式进行治疗,但由于抗癌药物选择性差、不能有效靶向分布至肺部,导致药物不良反应较大。因此,为了提高疗效,减轻不良反应,构建一种肺靶向给药系统将有十分重要的理论意义和实用价值。本文采用固体分散法(DBaumNC专利新技术)制备的新型多西他赛脂质体(Docetaxel liposome,DTX-LP),经实验证实具有显著兔肺靶向性,有望提高肺癌的治疗效果,降低全身毒副作用。目的采用DBaumNC专利新技术,考察并确立DTX-LP的制备工艺,完成放大制备,建立DTX-LP的质量评价体系,初步拟订其质量标准。方法1.建立测定体内和体外DTX含量的HPLC方法。2.采用单因素试验,按逐级(5倍、10倍和20倍等)放大方式,考察并建立DTX-LP的制备工艺。3.以给药1.5h兔组织分布为标准,进行DTX-LP的肺靶向性评价,建立体内质量评价指标;再结合体外质量评价指标,建立DTX-LP的质量评价体系。4.采用扫描电镜法,观察固体分散体的表面形态;采用透射电镜法,观察DTX-LP的形态。5.采用差式扫描量热分析法和傅立叶变换-红外光谱法,确定固体分散体中DTX的物理存在状态。6.采用马尔文激光粒度仪,测定DTX-LP的粒径和Zeta电位。7.采用鱼精蛋白凝聚法,测定DTX-LP的包封率。8.采用透析袋法,考察DTX-LP的体外释放及其缓释特性。结果1.建立了有效、专属性强的测定体内外DTX含量的HPLC方法。2.通过逐级(5倍、10倍和20倍等)放大方式,建立了制备DTX-LP的工艺。首次成功制得三批放大40倍的DTX-LP,形态圆整,可见双分子层结构,粒径较均匀,几乎无原辅料结晶;其固体分散体流动性好;经体内质量评价,证实具有显著肺靶向性。3.结合DTX-LP的体内和体外质量评价,建立了DTX-LP的质量评价体系。4.体外质量评价表明,DTX-LP形态圆整,粒径范围在500~800nm,带负电荷,包封率大于80%,混悬液接近中性,具有缓释特性;其固体分散体为白色粉末,流动性好,主药含量为6.55±0.08mg/g,以无定型或固体溶液状态存在,2~8℃条件下贮藏12个月含量和包封率无显著变化。5.初步拟订了DTX-LP的质量标准。结论1.成功建立了按逐级(5倍、10倍和20倍等)放大方式制备DTX-LP的工艺,该制备工艺具有操作简便、质量稳定、重复性好等优点,为DTX-LP的工业化生产奠定较好的基础。2.首次建立了DTX-LP的质量评价体系,初步拟定了DTX-LP的质量标准。
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