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目的:通过观察Tribbles同源蛋白3(TRB3)过表达及表达下调与丝裂素活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(MAPK/ERK)信号通路在腺病毒转染小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞MLE-12上皮细胞-间充质转分化(EMT)的关系,探讨TRB3及MAPK/ERK在肺纤维化中的相互作用。方法:1.实验分组:空白对照组(C组),绿色荧光蛋白(GFP)示踪基因Ad-GFP感染组(G组),Ad-TRB3感染组(TRB3组),Ad-TRB3-sh RNA感染组(TRB3-sh RNA组),单纯TGF-β1刺激组(T组),TGF-β1+Ad-GFP组(T+GFP组),TGF-β1+Ad-TRB3感染组(T+TRB3组),TGF-β1+Ad-TRB3-sh RNA感染组(T+TRB3-sh RNA组);2.Ad-GFP,Ad-TRB3,Ad-TRB3-sh RNA载体的构建,鉴定及扩增;3.以不同感染复数感染对数生长期的MLE-12,通过荧光显微镜和流式细胞技术了解最佳感染效率;4.CCK8法测定各组细胞DNA的合成;5.FACS法检测各组细胞凋亡情况;6.q PCR法检测TRB3,胶原蛋白Ⅰ(CollaⅠ),CollaⅢ,a平滑肌肌动蛋白(a-SMA),m RNA的表达(48h进行检测);7.Westernblot法检测各细胞TRB3,p-ERK1/2,ERK1/2,p-p38MAPK,p38MAPK,钙黏素(E-Cadherin),波形蛋白(Vimentin),纤维化连接蛋白(Fibronectin),a-SMA蛋白的表达(48h进行检测);8.ELISA法检测各组细胞中CollaⅠ,CollaⅢ,干扰素-r(IFN-r),肿瘤坏死因子-a(TNF-a)的含量(48h进行检测);9.Spss17.0统计学软件进行实验结果数据分析。结果:TGF-β1刺激小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞MLE-12后,TRB3的表达增加。TRB3表达上调时,促进MLE-12中CollaⅠ、CollaⅢ及a-SMA m RNA的表达,同时使p-ERK1/2、ERK1/2、p-p38MAPK、p38MAPK、Vimentin、Fibronectin、TNF-a蛋白表达增加,E-Cadherin、IFN-r蛋白表达减少,促进细胞凋亡。当TRB3表达下调时,MLE-12中E-Cadherin、IFN-r蛋白表达增加,CollaⅠ、CollaⅢ及a-SMA m RNA的表达下调,同时p-ERK1/2、ERK1/2、p-p38MAPK、p38MAPK、Vimentin、Fibronectin、TNF-a蛋白表达减少,细胞凋亡速度减慢。结论:1.TGF-β1促进MLE-12细胞MET,导致肺间质纤维化的发生。2.TRB3表达上调可能通过MAPK/ERK信号通路促进TGF-β1刺激的MLE-12细胞MET,增加细胞外基质(ECM)的沉积,促进肺间质纤维化。3.TRB3表达下调可能通过MAPK/ERK信号通路抑制TGF-β1刺激的MLE-12细胞MET,减少ECM沉积,抑制肺间质纤维化。