五倍子提取物的体外抗氧化作用研究

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由于机体内一些外源性自由基和内源性自由基的代谢过程,导致氧分子产生过量氧自由基及氧化应激。活性氧的介入引发细胞内外多种具有生物活性的化合物相互作用,最终导致机体产生病理变化。为了有效预防自由基对机体的损伤,维持正常的生命活动,已开发和研究了许多天然抗氧化剂和合成抗氧化剂。近年来,人工合成抗氧化剂如二叔丁基羟基甲苯(butylated hydroxy toluene,BHT)和叔丁基羟基茴香醚(butylated hydroxy anisole,BHA)等的安全性受到质疑,而天然抗氧化剂以其来源广、抗氧化活性大、安全性高等特点倍受人们的亲睐。因此研究开发高效安全的天然抗氧化剂,成为当今抗氧化剂研究领域中的热点之一。五倍子(Galla chinensis)是一种天然无毒的传统中药,由绵蚜科昆虫在其寄主植物盐肤木叶总轴的翅叶上形成,具有潜在的开发前景。目前关于五倍子的研究多集中在抗菌,抗病毒,抑突变,加速血液凝固及收敛作用,对其清除自由基和抗线粒体氧化损伤的性能尚未见全面报道。本实验旨在研究五倍子提取物的抗氧化作用,为探索其药理机制提供实验依据。首先,采用4倍量的丙酮:水(2:1)于50℃浸提,再用乙醚和乙酸乙酯依次萃取,经减压浓缩后烘干,得到五倍子提取物GCE。然后通过建立体外化学模拟体系和鼠肝线粒体损伤模型,包括DPPH·/O2-·/·OH清除体系,还原能力分析体系,Fe2+诱导的脂质过氧化反应和β-胡萝卜素/亚油酸自氧化体系,Fe2+-Vc系统诱导肝线粒体脂质过氧化水平、肿胀程度、蛋白质羰基水平、ATP酶的活性以及生成超氧阴离子的多少来评价GCE总的抗氧化活性。体外抗氧化实验结果显示,五倍子提取物能够有效清除DPPH自由基、羟基自由基及超氧离子自由基,对脂质过氧化有明显的抑制作用,有较强的还原力和总抗氧化力,且呈现较好的剂量依赖效应。GCE对DPPH·和O2-·的半数清除浓度IC50分别为13.75μg/mL和46.15μg/mL,而Vc分别为10.27μg/mL and 54.35μg/mL;清除·OH的能力明显强于D-甘露醇,在0.25 mg/mL时,GCE的清除率可达58.03%,是D-甘露醇(13.56%)的4.28倍;有较强的还原力和总抗氧化力;对Fe2+诱导的脂质过氧化反应表现出较好的抑制作用。线粒体抗氧化实验结果表明,五倍子提取物可以有效降低蛋白质羰基的含量,减缓线粒体的肿胀,恢复ATP酶的活性,保证了线粒体的膜内外渗透压;对线粒体脂质过氧化反应和O2-·产生有一定的抑制作用,对生物膜具有保护作用。综上所述,GCE具有显著的抗氧化活性,且能有效地保护线粒体的氧化损伤。但是否有较好的体内抗氧化活性,还有待进一步的实验研究。结果表明,五倍子可以作为一种有抗氧化活性的保健品或药物开发利用。
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