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内生真菌可产生丰富的次级代谢产物，是抗生素、免疫抑制剂以及降血脂等类药物的重要资源库。药用植物中存在大量的内生真菌，这些内生真菌可直接参与到药用植物体内有效成分的合成。而由于内生真菌基因组中沉默基因簇的存在，绝大多数的次级代谢产物在实验条件下不能完全表达。化学表观遗传修饰剂（Chemical epigenetic manipulation）可特异或半特异的抑制化学表观遗传修饰酶的活性，能对内生真菌的生物合成进行调控。激活一部分未表达次级代谢产物的沉默基因簇，将大大的推进内生真菌次级代谢产物的研究。本文主要利用化学表观遗传修饰剂（5-氮杂胞苷）对牛蒡内生真菌进行激活研究，并对激活后的次级代谢产物进行杀虫活性筛选。 本文主要开展了以下两方面的工作: 一、牛蒡次级代谢产物及八株牛蒡内生真菌次级代谢产物杀虫活性的筛选 首先利用石油醚、乙酸乙酯以及正丁醇对牛蒡的次级代谢产物进行提取，并筛选了三相提取物的杀虫活性，发现石油醚相的杀虫活性最好，继而对石油醚相提取物的化学成分进行GC/MS分析，发现其主要成分为酯、醛、酸、烯等四类化合物，其含量所占比例分别为:37.83％、7.86％、2.86％、1.74％，占了牛蒡石油醚提取物总量的50.29％。然后对牛蒡中的内生真菌进行分离纯化，得到二十三株内生真菌，分别命名为:NY-1、NY-2、NY-3、NY-4、NY-5、NY-6、NY-7、NY-8、NY-9、NY-10、NY-11、NJ-1、NJ-2、NG-1、NG-2、NG-3、NG-4、NG-5、NG-6、NG-7、NG-8、NG-9以及NG-10。对其中八株内生真菌的菌丝体及发酵液的提取物进行了杀虫活性的筛选，并以三种生成中常见化学农药为对照。发现NY-5发酵液提取物的杀虫活性最好。最后对NJ-1菌丝体及发酵液的提取物进行杀虫活性跟踪，得出NJ-1具有杀虫活性的化合物主要存在于其发酵液中，尤其是经过石油醚-乙酸乙酯(5∶1)洗脱体系洗脱的产物。 二、化学表观遗传修饰剂（5-氮杂胞苷）对八株牛蒡内生真菌次生代谢产物的激活研究 首先利用不同浓度的5-氮杂胞苷对从牛蒡中的八株内生真菌进行激活，对激活后的真菌菌丝体及发酵液的提取物进行了杀虫活性筛选，发现被10μM的5-氮杂胞苷激活的NY-1的发酵液提取物的杀虫活性最好，其LD50是对照组中活性最好的敌敌畏的LD50值的16.5倍。然后对菌株对菌株NY-1以及NJ-1利用18srDNA及ITS序列检测技术进行了鉴定，分别鉴定NY-1为黑曲霉（Asperillium niger）和NJ-1为四孢脉孢菌（Neurospora tetrasperma）。最后对杀虫活性最好的NY-1被10μM的5-Aza激活后发酵液的提取物的杀虫活性进行了跟踪。确定杀虫活性最好的物质存在于洗脱体系石油醚-乙酸乙酯(20∶1)的洗脱产物。