[目的]随着我国经济水平的不断发展,人民的健康意识和对健康的重视程度也越来越高,临床上成人正畸所占的比例正在逐年快速地增长。然而,成人正畸患者尤其是中老年女性患者,由于年龄的增长而发生骨代谢增龄性变化,常会伴有骨质疏松的疾患。骨质疏松又会给正畸带来很多困难和挑战,正畸中容易出现牙槽骨的吸收、牙松动等严重问题。大量的临床和基础研究证实[1-4]滇产彝药恒古骨伤愈合剂(Osteoking)可有效地促进骨形成,从而对骨质疏松有治疗作用。本课题通过建立骨质疏松SD(Sprague-Dawley,SD)大鼠模型,模拟中老年女性绝经后骨质疏松状态,然后采用恒古骨伤愈合剂对骨质疏松SD大鼠进行干预,再对干预后的SD大鼠下颌牙槽骨显微结构相关指标和骨代谢指标进行测量和分析,探索恒古骨伤愈合剂对下颌牙槽骨代谢的影响及机制,为临床上骨质疏松正畸患者减少牙槽骨吸收、牙松动、易复发等严重并发症提供一定的实验依据,并开拓新的治疗途径。[方法]1.骨质疏松SD大鼠模型的建立:3月龄雌性SD大鼠48只,适应性喂养2周后,随机分为两组:卵巢切除组42只、脂肪切除组6只。卵巢切除组行卵巢切除术(Ovariectomy,OVX),脂肪切除组切除同等重量的皮下脂肪。术后相同条件下喂养12周,每组处死6只(卵巢切除组随机处死6只、脂肪切除组6只全部处死),取下颌牙槽骨采用显微CT(Micro-Computed Tomography,Micro-CT)进行骨密度(Bone Mineral Density,BMD)测定。2.建模成功的36只卵巢切除组SD大鼠再随机分为两组:实验组和对照组,每组1 8只。实验组:灌胃恒古骨伤愈合剂(剂量为人鼠等效剂量的1倍,0.59mL/Kg),每隔一天给药1次,每周称重一次,根据体重变化及时调整给药剂量。对照组:灌胃同等比例生理盐水,其余条件一致。每组大鼠再随机分为3个组:4w组、8w组、12w组(代表喂药时间分别为4周、8周、12周),每组各6只。3.按分组的相应时间点,将实验大鼠麻醉后处死并剥离提取下颌牙槽骨,左侧下颌牙槽骨用4%多聚甲醛固定48小时后应用Micro-CT对骨显微结构骨小梁数量(Trabecular Number,Tb.N)、骨小梁厚度(Trabecular Thickness,Tb.Th)、骨小梁分离度(Trabecular Separation/Apacing,Tb.Sp)、骨体积分数(Bone Volume/Total Volume,BV/TV)、结构模式指数(Structural Mode Index,SMI)进行测量和分析;右侧下颌牙槽骨在液氮浸泡下提取骨总蛋白,采用ELISA(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)试剂盒进行碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate Resistant Acid Phosphatase,TRACP)的测定。4.统计分析:采用SPSS22.0进行统计学分析,计量资料经正态性检验符合正态分布,测量结果用均数±标准差(x±s)表示,分别采用单因素方差分析和独立样本t检验对数据进行处理。实验组和对照组组内的4w组、8w组、12w组相互的差异性比较用单因素方差分析;各时间点实验组与对照组的比较采用独立样本t检验进行分析。[结果]1.骨质疏松SD大鼠建模成功:手术后12周卵巢切除组骨密度较脂肪切除组骨密度明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。卵巢切除组的SD大鼠骨小梁明显变细变窄,数量减少,小梁间间距增宽,表明骨质疏松SD大鼠建模成功。2.恒古骨伤愈合剂改善骨质疏松SD大鼠下颌牙槽骨骨显微结构:恒古骨伤愈合剂干预后,第4周、第8周、第12周,实验组BMD、Tb.N、BV/TV均明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),而Tb.Sp、SMI实验组明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。第4周,实验组Tb.Th与对照组Tb.Th 比较,差异无统计学意义(P>0.05);第8周、第12周,实验组Tb.Th较对照组Tb.Th明显增加,差异均具有统计学意义(P<0.05)。3.恒古骨伤愈合剂促进骨质疏松SD大鼠下颌牙槽骨骨形成:恒古骨伤愈合剂干预后,第4周、第8周、第12周,实验组ALP的浓度较对照组ALP浓度明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组内的12w组、8w组与4w组相比较,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组内的12w组与8w组相比较,差异无统计学意义(P>0.05);实验组TRACP的浓度较对照组TRACP浓度明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);实验组内的12w组、8w组与4w组相比较,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组内的12w组与8w组相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]1.成功建立了雌性SD大鼠骨质疏松模型:采用卵巢切除手术建立大鼠骨质疏松模型,建模因素单一、手术简单、重复性好。2.恒古骨伤愈合剂能有效促进骨小梁数量、厚度和骨体积分数的增加;降低骨小梁分离度和结构模式指数,从而提高骨质疏松大鼠下颌牙槽骨的骨量,改善骨微结构。3.恒古骨伤愈合剂对ALP和TRACP的活性具有调控作用,增加ALP的活性、降低TRACP的活性来促进骨形成、抑制骨吸收;并具有持续调控作用,达到一定程度后维持恒定水平。