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猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS),又称猪蓝耳病,是由PRRS病毒(PRRSV)感染所致的一种急性高度致死性传染病。由于其具有独特的ADE作用、中和抗体产生延迟、持续性感染以及较强的基因变异等生物学特性,使得PRRS未得到有效防治,给养猪业带来巨大的经济损失。PRRS疫苗刺激机体所产生的中和抗体在PRRS的免疫中发挥一定程度的保护性作用,但是这种保护作用并不完全,即中和抗体水平的高低不是衡量机体抗PRRSV的感染能力的唯一标准。因为在PRRS的抗感染免疫中细胞免疫占据主导地位,所以有必要从PRRS细胞免疫的基础上,探讨加强猪体免疫后对该病毒的保护作用。研究抗PRRSV免疫中各种细胞因子,筛选出其中与产生免疫抗体相关的关键细胞因子标志物,对评价PRRS疫苗的免疫效果,揭示PRRS致病机制、免疫应答机理、制定合理的免疫程序以及研究开发PRRSV疫苗、防控和消灭PRRS有重要意义。本课题通过从某种猪场筛选PRRSV抗原抗体阴性、CSFV抗原抗体阴性、PRV抗原阴性和PCV-2抗原阴性的相对洁净动物。建立阴性对照、实验动物模型、PRRSV免疫与实验感染模型。即将体重相似、生长状态良好、性别一致的仔猪40头,单独饲养在一个经过灭菌的猪舍中,饲喂的饲料和所用工具都经过IACUC认可,饲养人员要经过消毒后才能进出猪舍。将40头仔猪平均分为5组,分别为未免组、低免组、中免组、高免组和感染组,各组按着实验方案分别取第1、7、14、21天血液进行ELISA的抗体检测,并采用Real-time PCR和Western Blot的方法分别从基因水平和蛋白水平进行细胞因子的检测。ELISA抗体检测结果显示,未免组S/P值为0.35,低免组S/P值为0.531,中免组S/P值为1.494,高免组S/P值为2.163,感染组S/P值为3.165。表明实验方案中的未免组、低免组、中免组、高免组,感染组建立成功。此外不同免疫状态及感染状态仔猪血液淋巴细胞细胞因子中IFN-α、TGF-β具有较高转录水平,同其他组别相比差异显著。10种细胞因子在同一免疫状态及感染状态下比较,细胞因子TGF-β、IL-8、IFN-α具有较高的转录水平,与其他细胞因子相比差异极显著。Western Blot结果表明IFN-α和TGF-β具有较高的表达水平,综上表明仔猪血液淋巴细胞细胞因子IFN-α和TGF-β是仔猪感染RRRSV时承担主要免疫保护性作用的细胞因子。