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结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是一类常见的消化道恶性肿瘤,其发病率和死亡率均居前列。在我国,尽管直肠癌的发病率较为稳定,但是近年来随着饮食结构的改变,结肠癌的发病率呈明显的上升趋势。结肠癌的形成是由基因改变和环境因素共同参与的。环境因素包括年龄,性别,高脂肪饮食,肥胖,酒精摄入和缺少运动。在众多的基因改变中,鼠类肉瘤病毒癌基因(Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog,KRAS)是最常见的结肠癌激活基因。KRAS基因,位于12p 12.1,编码KRAS蛋白(属于小GTP酶家族)。KRAS的激活增加了肠坏死的发生率并加重了肠坏死的进展。另外,KRAS基因的激活可以调控RAS/PI3K/AKT信号通路,进而影响细胞的增殖,侵袭和凋亡。因此,KRAS隶属于原癌基因家族并且能够使细胞由正常向异常分化改变。本研究中,结直肠癌组织的KRAS蛋白含量明显高于癌旁组织,但KRAS的信使RNA(messenger RNA,mRNA)的含量却并未出现明显的差异。这表明KRAS蛋白在结直肠癌组织中的高表达可能涉及转录后调控。非编码RNA对mRNA的调控是最经典的转录后调控模式之一。长链非编码RNA(Long non-coding RNA),是超过200nt的非编码RNA,其在生物中发挥重要的调控功能。目前已经发现了 lncRNA的多种生物学功能,其中重要功能之一是作为内源性的miRNA吸附海绵,对miRNA产生竞争、抑制或降解作用,继而进一步影响miRNA的后续功能。核内丰富转录本1(Nuclear enriched abundant transcript 1,NEAT1),又称为核旁斑集合转录本 1(Nuclear paraspeckle assembly transcript 1,NEAT1),作为 lncRNA 的一种,近年来因为其可影响肿瘤生物学行为而受到了越来越多的关注。据文献报道,NEAT1的含量变化与肺癌,乳腺癌,肝癌和结肠癌预后相关。然而,NEAT1的原癌机制至今尚未完全阐明。在本研究中,我们首先发现lncRNA NEAT1在结直肠癌中显著升高,细胞实验证实敲降lncRNANEAT1能够抑制结直肠癌细胞的增殖与迁移,并促进其凋亡。我们进一步利用lncRNA下游预测工具,预测出miR-193a-3p可能为NEAT1调控的下游靶点,并通过敲降NEAT1及miR-193a-3p来解释他们的相互关系和机制。对于miR-193a-3p的下游靶点,我们运用生物信息分析预测出KRAS可能为miR-193a-3p的下游靶点,并通过细胞证实了这种调控关系。我们进一步应用小干扰RNA(RNAi)和反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,aso)技术抑制了 NEAT1的表达,同时使用miR-193a-3p过表达和抑制剂,证实了 NEA1作为miR-193a-3p的吸附或内源性竞争RNA,对miR-193a-3p在体内外的功能,包括间接对KRAS 蛋白的调控进行了研究。得到lncRNA-miRNA-mRNA调控通路,建立起了非编码RNA和mRNA、蛋白之间的联系。综上所述,本研究主要发现了 lncRNA NEAT1能够特异性地抑制miR-193a-3p的表达,从而间接抑制了 miR-193a-3p对KRAS mRNA的转录后调控,使得KRAS蛋白表达增高,从而揭示了 lncRNANEAT1/miR-193a-3p/KRAS调控通路在结直肠癌的发生发展中的机制,为结直肠癌的治疗提供了潜在的靶点。