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目的:多药耐药相关蛋白-2(MRP-2)是由ABCC2基因编码的转运蛋白,主要负责向细胞外转运排放一些内源性和外源性底物。本实验旨在通过一系列细胞生物学试验探讨ABCC2(1249G>A)基因多态性对多靶向抗肿瘤药物索拉菲尼转运的影响并初步研究其分子作用机制,为临床施用索拉菲尼的个体化治疗方案提供一定的参考。方法:1利用生物工程技术构建携带人类ABCC2-1249G和ABCC2-1249A基因的慢病毒载体,包装病毒并转染HEK293细胞,筛选出稳定过表达ABCC2-1249G和ABCC2-1249A基因的重组细胞,扩大培养。2通过cck-8试验比较表达ABCC2-1249G和表达ABCC2-1249A的重组HEK293细胞对索拉菲尼毒性的敏感性。3通过液-液萃取提取不同细胞组细胞累积吸收和排放的索拉菲尼,使用高效液相色谱法(HPLC)测定提取液中索拉菲尼的含量并比较不同细胞组索拉菲尼转运的情况。4分别提取膜蛋白,测定并比较ABCC2-1249G和ABCC2-1249A蛋白的ATP酶活性。结果:构建得到能分别稳定表达ABCC2-1249G和ABCC2-1249A的重组HEK293细胞,且RT-PCR实验和蛋白印迹实验显示二者表达水平相当;索拉菲尼对过表达ABCC2-1249A的HEK293细胞半数抑制率(IC50)显著高于过表达ABCC2-1249G的细胞组或空白对照组;而在MRP-2表达水平相当的情况下,ABCC2-1249A细胞组细胞内索拉菲尼累积量显著少于ABCC2-1249G细胞组;从ABCC2-1249A细胞中提取的膜蛋白ATP酶活性显著高于从ABCC2-1249G中提取的膜蛋白。结论:作为一种ATP依赖型转运蛋白,MRP-2参与索拉菲尼在细胞内的跨膜转运,且ABCC2(1249G>A)基因多态性提高了该转运蛋白的ATP酶活性,也因此促进了索拉菲尼的外排转运。