【摘 要】
：
目的:膀胱癌是最常见的泌尿系统恶性肿瘤,同时是世界第九常见恶性肿瘤。对膀胱癌发生发展的机制进行深入的了解,将有助于改善膀胱癌的诊断与治疗手段,使更多患者从中受益。CARMA3在许多类型肿瘤中均高表达,并能在其中促进细胞的增殖与转移等多方面功能。一般认为CARMA3能够响应G蛋白偶联受体与受体酪氨酸激酶激活NF-κB通路,进而促进一系列下游癌基因的表达。因此在膀胱癌中CARMA3可能促进肿瘤的生长并
论文部分内容阅读
目的:膀胱癌是最常见的泌尿系统恶性肿瘤,同时是世界第九常见恶性肿瘤。对膀胱癌发生发展的机制进行深入的了解,将有助于改善膀胱癌的诊断与治疗手段,使更多患者从中受益。CARMA3在许多类型肿瘤中均高表达,并能在其中促进细胞的增殖与转移等多方面功能。一般认为CARMA3能够响应G蛋白偶联受体与受体酪氨酸激酶激活NF-κB通路,进而促进一系列下游癌基因的表达。因此在膀胱癌中CARMA3可能促进肿瘤的生长并可能作为潜在的治疗靶标。方法:在膀胱癌组织与细胞中利用实时定量PCR法检测CARMA3的表达水平,并在膀胱癌细胞中验证CARMA3对增殖、凋亡、转移等细胞功能的影响。利用RNA测序寻找CARMA3潜在的下游调控分子并利用实时定量PCR法与免疫印迹法进行验证。利用NF-κB抑制剂和Ch-IP确认CARMA3对其中一个调控分子CPS1的具体作用机制。在膀胱癌组织与细胞中利用实时定量PCR法检测CPS1的表达水平,并在膀胱癌细胞中验证CPS1对增殖与凋亡等功能的影响,并在细胞增殖与凋亡功能上确定CPS1对CARMA3的回复作用。利用膀胱癌细胞的代谢组学展示CARMA3对于细胞代谢水平的影响。通过上下游代谢物测定验证CARMA3通过CPS1对尿素循环通路的影响。通过核酸代谢物对CPS1与CARMA3在增殖与凋亡上的回复作用,验证CPS1与CARMA3在核酸代谢上的作用结果:1.在膀胱癌组织与细胞中CARMA3在转录水平的表达量增加,在膀胱癌细胞中CARMA3能够促进增殖、抑制凋亡、促进迁移与侵袭等细胞功能。2.通过RNA测序得到CARMA3潜在的下游调控分子CPS1,并验证了CARMA3能够通过NF-κB调控CPS1的表达量。3.在膀胱癌组织与细胞中利用实时定量PCR法检测CPS1的表达水平增加,并在膀胱癌细胞中验证发现CPS1能够促进增殖、抑制凋亡等细胞功能.4.通过回复实验验证了,CPS1能够在细胞增殖与凋亡功能上回复敲减CARMA3引起的抑制增殖与促进凋亡的作用。5.膀胱癌细胞的代谢组学与代谢物检测验证了CARMA3与CPS1的代谢功能的相关性。6.添加核酸代谢物能够回复敲减CPS1与CARMA3抑制增殖与促进凋亡上的作用。结论:1.CARMA3在膀胱癌组织与细胞中高表达,并且能够通过细胞增殖与凋亡、迁移与侵袭几种细胞功能影响膀胱癌细胞,起到促进膀胱癌细胞生长的作用。2.CARMA3能够影响MAPK、TGFβ与尿素循环等关键通路,并通过NF-κB通路的转录因子NF-κB1调控CPS1的表达。CPS1在膀胱癌中高表达,并且能够通过细胞增殖与凋亡影响膀胱癌细胞生长。同时CARMA3能够通过CPS1影响膀胱癌细胞的增殖与凋亡。3.CARMA3能够影响尿素循环相关代谢途径,并通过CPS1影响肿瘤核酸代谢途径。并且CARMA3与CPS1能够通过核酸代谢相关代谢物影响膀胱癌细胞增殖与凋亡。
其他文献
前言:胃蛋白酶原C（Pepsinogen C,PGC）是由胃内主细胞分泌的一种天冬氨酸蛋白酶,在胃内的酸性条件下激活为有活性的胃蛋白酶C而具有消化胃内蛋白质的功能。编码PGC蛋白的人PGC基因定位于6p21.1,完整的人PGC基因共含9个外显子和8个内含子,全长10.7kb。PGC蛋白出现于胚胎发育晚期,主要表达于胃部,是胃粘膜细胞分化成熟的终末产物,是消化功能逐渐成熟的标志。PGC在正常胃粘膜是
目的:胶质瘤是神经系统中最常见的恶性肿瘤,约占颅内原发性肿瘤的40%～50%。尽管进行积极的手术治疗,并在术后辅以放、化疗,但胶质瘤患者的预后并没有得到明显的改善,因此,分子靶向治疗有望成为一种新的胶质瘤治疗策略。RNA结合蛋白（RNA binding protein,RBPs）是一类重要的基因转录后调控蛋白,通过与特异性靶RNA结合,参与调控RNA分子的剪接、降解和稳定性等代谢过程,在细胞增殖、
目的:肝细胞癌（HCC）是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一,以预后差,易发生早期转移为著。从全球范围来看,慢性乙型肝炎病毒（HBV）以及丙型肝炎病毒（HCV）感染占全世界肝癌患者的75%-80%,其中,撒哈拉以南非洲和东亚是肝细胞癌的重灾区,中国肝癌患者数量就达世界患者总数的50%以上,这与其巨大的HBV感染人群是分不开的。早期浸润、转移和复发等生物学行为,使得肝癌的临床治疗成为当今难以攻克的课题,
目的:作为凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein,IAP）家族的两个重要成员,survivin和X连锁凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP）在包括结直肠癌在内的众多肿瘤组织中显著高表达,参与了肿瘤发生发展的众多生物学过程,一直被认为是肿瘤治疗的潜在靶标。既往研究报道,survivin可以与XIAP
目的:缺血性脑卒中是病因复杂的疾病,血小板的激活和聚集在动脉粥样硬化和脑动脉血栓形成中起着关键作用,因此,抗血小板药物是非心源性脑卒中二级预防的核心治疗措施。氯吡格雷是ADP受体P2Y12的抑制剂,能够与P2Y12受体结合而阻断ADP依赖的血小板聚集通路并抑制血小板的聚集。但氯吡格雷的治疗效应却存在较大变异,部分患者尽管按照指南推荐服用标准剂量的氯吡格雷仍出现治疗失败,造成约6-9%的患者在脑卒中
研究目的:多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）是最常见的一类恶性浆细胞肿瘤,由于单克隆浆细胞恶性增殖、广泛浸润并分泌大量单克隆免疫球蛋白（M蛋白）从而引起广泛骨质破坏、感染、贫血、高钙血症及肾功能不全。近年来,随着新药的临床应用以及自体干细胞移植的广泛开展对初诊及难治复发患者的缓解率及无病生存期得到明显改善。然而,MM仍然是一种无法治愈的疾病。因此,需要我们进一步探索MM的发生、
脑桥小脑发育不良（Pontocerebellar hypoplasias,PCH）是一种罕见的遗传性神经退行性疾病,临床症状表现为严重的认知障碍,运动障碍以及癫痫发作。神经放射学和神经病理学特征将PCH分为19个亚型,其共同特征为腹桥、下橄榄和小脑的进行性变性。目前已鉴定出16个与PCH相关的基因,包括VRK1、EXOSC3、TSEN54、TSEN2、TSEN34、SEPSECS、RARS2、CH
目的:支气管肺发育不良（BPD）是早产儿常见且严重的呼吸系统并发症,以肺泡发育停滞为主要特征。其病死率高,即使存活也会伴有远期的肺通气、换气及肺泡弥散功能障碍,严重影响患儿的生存质量。但目前尚无有效的治疗手段。Ⅱ型肺泡上皮细胞（AECⅡ）作为肺泡上皮细胞的“祖细胞”,当肺上皮受损时,不仅可以自我更新,还能增殖并分化为I型肺泡上皮细胞（AEC I）,在肺泡结构和功能的修复中起着重要的作用。大量研究证
目的:创伤后应激障碍（Post-traumatic stress disorder,PTSD）是一种指个体经历、遭遇或目睹到涉及自身或他人危及生命的应激性事件或处境所导致的个体延迟出现和持续存在的精神障碍。研究发现PTSD患者记忆障碍,以及与应激紧密相关的下丘脑-垂体-肾上腺（The hypothalamic–pituitary–adrenal axis,HPA）轴功能异常。前额内侧皮质（medi
研究目的 目前乳腺癌已成为国内外女性发病率最高、死亡率第二高的恶性肿瘤,已成为重要的全球公共健康问题。作为女性肿瘤中最常见的一种,部分乳腺癌有着较高的侵袭性,危及患者生命。仍有一部分乳腺癌患者,初诊时即已出现了远处转移,这部分患者总生存率远远低于诊断时尚为早期的患者,预后较差。尽管随着基因检测、药物敏感性筛查等科学技术手段的快速发展,手术治疗、放疗、化疗与内分泌治疗等多种治疗策略日趋完善,但乳腺癌