【摘 要】
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目的:初步探究幽门螺杆菌脂多糖对胃癌细胞株SGC7901多药耐药性的作用;探讨生脉注射液对幽门螺杆菌脂多糖所诱导的SGC7901细胞多药耐药性的逆转作用。研究方法:1.培养幽门螺杆菌,经尿素酶试验、过氧化酶试验鉴定后,提取脂多糖。2.CCK-8法测定5-氟尿嘧啶（5-Fu）、顺铂、阿霉素的IC50值,进行下一步实验。3.CCK-8法测定不同时间点幽门螺杆菌脂多糖与SGC7901细胞共培养的OD45
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目的:初步探究幽门螺杆菌脂多糖对胃癌细胞株SGC7901多药耐药性的作用;探讨生脉注射液对幽门螺杆菌脂多糖所诱导的SGC7901细胞多药耐药性的逆转作用。研究方法:1.培养幽门螺杆菌,经尿素酶试验、过氧化酶试验鉴定后,提取脂多糖。2.CCK-8法测定5-氟尿嘧啶（5-Fu）、顺铂、阿霉素的IC50值,进行下一步实验。3.CCK-8法测定不同时间点幽门螺杆菌脂多糖与SGC7901细胞共培养的OD450值,绘制生长曲线,选取适合的脂多糖浓度,进行下一步实验。4.CCK-8法测定幽门螺杆菌脂多糖对SGC7901细胞多药耐药性的影响。5.CCK-8法测定生脉注射液的细胞毒性,选取无毒浓度进行下一步实验。6.CCK-8法测定无毒浓度的生脉注射液逆转幽门螺杆菌脂多糖所诱导的SGC7901细胞多药耐药性的作用。7.流式细胞仪分析生脉注射液对幽门螺杆菌脂多糖所诱导的SGC7901细胞凋亡的影响。结果:1.于哥伦比亚培养基上,可见细小的或针尖样的半透明半球形菌落,经尿素酶试验、过氧化酶试验鉴定,可确定为幽门螺杆菌。2.5-Fu、顺铂、阿霉素对SGC7901细胞均有明显的抑制作用,并呈时效及量效关系,IC50值分别为27.77±4.43μM、2.97±0.65μM、0.32±0.02μM。3.共培养生长曲线显示,幽门螺杆菌脂多糖浓度为1μg/ml时,与对照组最为相关,故选用此浓度。4.幽门螺杆菌脂多糖可降低5-Fu、顺铂、阿霉素三种化疗药物对SGC7901细胞的抑制率。5.生脉注射液能抑制SGC7901的增殖,并呈时效及量效关系。当生脉注射液浓度为50μl/ml时,细胞抑制率均不超过10%,可作为无毒浓度。6.生脉注射液能增加幽门螺杆菌脂多糖所诱导的多药耐药细胞对5-Fu、顺铂、阿霉素的敏感性,实现多药耐药逆转,相对逆转倍数分别是1.76,1.46,1.60。7.流式细胞仪检测结果显示,Hp-LPS可抑制5-Fu对SGC7901的凋亡作用,生脉注射液能够促进Hp-LPS干预后SGC7901细胞株的凋亡,对照组、5-Fu组、LPS组及生脉组的凋亡指数分别为6.8±1.26、42.1±0.73、31.7±1.01及38.2±0.85。结论:本实验证明了幽门螺杆菌脂多糖可降低多种化疗药物对SGC7901细胞的抑制率,促进胃癌细胞增殖,抑制凋亡,诱导多药耐药;本实验还证明了无毒浓度的生脉注射液能增强多种化疗药物对幽门螺杆菌脂多糖所诱导的SGC7901细胞的抑制率,促进细胞凋亡,发挥逆转多药耐药性的作用。
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