目的:观察γ-羟基丁酸受体(gamma-hydroxybutyric acid receptor，GHBR)在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的作用及可能机制，为临床治疗缺血性脑损伤寻找新的靶标。 方法:选取成年雄性SD大鼠，体重260±20g，随机分为8组。分别为假手术组(Sham组)，模型组(Isc／R组)，NCS-356 160μg／kg组(N1组)，NCS-356 320μg／kg组(N2组)，NCS-356 640μg／kg组(N3组)，NCS-382(640μg／kg)组，NCS-382640μg／kg+NCS-356 640μg／kg(NCS-382+N3)组，尼莫地平600μg／kg组(Nim组)。采用改良的Longa法制备大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型。各组均于缺血前30min和再灌注0时两次经侧脑室给药，Sham组和Isc／R组给予等体积的生理盐水。缺血2h复灌2h后动物进行Zea Longa法神经功能评分，复灌24h后， 实验分两部分： 第一部分用TTC染色法测定大鼠脑梗死体积，应用免疫组织化学染色法测定大鼠缺血侧大脑皮质Bax，Bc1-2，Caspase-3蛋白的表达，应用流式细胞仪测定细胞凋亡百分率； 第二部分应用流式细胞仪测定神经细胞内游离钙离子浓度，采用分光光度法测定大鼠大脑缺血侧皮质中总一氧化氮合酶(tNOS)，诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性和一氧化氮(NO)含量；应用放射免疫法测定大鼠大脑缺血侧皮质中环磷酸鸟苷(cGMP)含量。 结果: 1.NCS-356在MCAO大鼠再灌注损伤中的作用 1.1 NCS-356对MCAO大鼠神经功能和脑梗死体积的影响 Isc/R组大鼠神经功能评分，脑梗死体积明显高于Sham组(P<0.01)；N3组，Nim组则明显低于Isc／R组(P<0.05)；NCS-382组与Isc／R比较，NCS-382+N3组与NCS-382组比较均无统计学差异(均P>0.05)。 1.2 NCS-356对MCAO大鼠大脑皮质Bcl-2，Bax，Caspase-3蛋白表达及细胞凋亡百分率的影响 在MCAO大鼠大脑皮质，Isc／R组Bcl-2，Bax，Caspase-3阳性细胞表达，细胞凋亡百分率均显著高于Sham组(均P<0.01)，而Bcl-2／Bax比值显著低于Sham组(P<0.01)；N1,N2,N3,Nim组Bcl-2阳性细胞的表达和Bcl-2／Bax比值均较Isc／R组升高P<0.05，P<0.01，P<0.01，P<0.01)；N2，N3，Nim组Bax，Caspase-3阳性细胞表达均较Isc／R组降低(均P<0.05，P<0.01，P<0.01)，细胞凋亡百分率均较Isc／R组降低(均P<0.01)。单用GHBR拮抗剂NCS-382后，以上各指标值与Isc／R组接近(均P>0.05)；NCS-382+N3组与NCS-382组也基本接近(P＞0.05)。NCS-382+N3组Bcl-2阳性细胞数和Bcl-2／Bax比值较N3组降低(均P<0.05)，Bax，Caspase-3阳性细胞表达，细胞凋亡百分率均较N3组增高(均P<0.05，P<0.01)。 2 NCS-356对MCAO大鼠的脑保护作用机制 2.1 NCS-356对MCAO大鼠缺血再灌注损伤皮质神经元内游离Ca<2+>含量的影响Isc瓜组神经细胞内游离Ca<2+>浓度较Sham组明显升高(P<0.01)．N1，N2，N3和Nim组的Ca<2+>含量低于Isc／R组(P>0.05，P<0.05，P<0.01，P<0.01)；NCS-382组Ca<2+>含量与Isc／R 组接近(P>0.05)；NCS-382+N3组Ca<2+>含量与NCS-382组也基本接近(P＞0.05)，但比N3组升高(P<0.01)。 2.2 NCS-356对MCAO大鼠缺血再灌注损伤皮质cGMP含量的影响 Isc瓜组cGMP较Sham组明显升高(P<0.01)；N3组和Nim组的cGMP含量均低于Isc／R组(均P<0.05)；NCS-382组的cGMP含量与Isc／R组接近(P＞0.05)；NCS-382+N3组的cGMP含量与NCS-382组接近(P>0.05)，与N3组比较显著升高(P<0.05)。 2.3 NCS-356对MCAO大鼠缺血再灌注损伤皮质tNOS，iNOS活性及NO含量的影响 Isc/R组tNOS，iNOS活性及NO含量均显著高于Sham组(均P＜O.01)；N2，N3，Nim组能降低iNOS活性和NO含量(P＜0.05，P＜O.01，P＜0.01)；N3，Nim组tNOS活性低于Isc/R组(P＜0.05)。NCS-382+N3组各指标值较N3组不同程度地升高(均P浓度，抑制tNOS，iNOS活性，减少NO及cGMP含量，提示激动GHBR对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用可能与GHBR-Go-Ca<2+>-NO-cGMP这条信号转导通路有关。