【摘 要】
：
研究背景组织细胞的低温保存是维持细胞活力和细胞功能的重要方法。然而,常规细胞冷冻保存方法的细胞活力和功能不太理想,这可能导致细胞在冷冻保存中凋亡和坏死。海藻糖在维持细胞结构和保护细胞免受压力方面发挥作用。然而,由于海藻糖难以通过细胞膜转运,其抗冻效果受到限制。近年来,人们已经探索了许多种将海藻糖引入哺乳动物细胞的方法。其中磷灰石纳米微粒(Nanoparticles,NP)是一种理想的介导材料,其对
论文部分内容阅读
研究背景组织细胞的低温保存是维持细胞活力和细胞功能的重要方法。然而,常规细胞冷冻保存方法的细胞活力和功能不太理想,这可能导致细胞在冷冻保存中凋亡和坏死。海藻糖在维持细胞结构和保护细胞免受压力方面发挥作用。然而,由于海藻糖难以通过细胞膜转运,其抗冻效果受到限制。近年来,人们已经探索了许多种将海藻糖引入哺乳动物细胞的方法。其中磷灰石纳米微粒(Nanoparticles,NP)是一种理想的介导材料,其对细胞活性和功能影响不大,并且可以向细胞提供足够数量的海藻糖。目的(1)磷灰石NP的生物学评估,其中包括基于磷灰石NP的细胞毒性评价、磷灰石NP联合海藻糖对细胞活力的影响。(2)磷灰石NP介导海藻糖进入细胞的过程以及海藻糖进入组织细胞的数量和加载效率。(3)冷冻保存后细胞内海藻糖对细胞活力和细胞功能的影响。方法和结果(1)研究使用人主动脉血管平滑肌细胞(Human aortic vascular smooth muscle cells,HA-VSMC)和人冠状动脉内皮细胞(Human coronary artery endothelial cells,HCAEC)作为实验材料,通过CCK-8测试评估了磷灰石NP对于两种细胞的细胞毒性。测试培养基中的五种不同浓度的磷灰石NP:0,0.5,1,2,4和10 mg/mL的细胞活力以及磷灰石NP与细胞之间不同接触时间(1至7天)的细胞活力。结果显示,对于培养基中磷灰石NP浓度在0和1 mg/mL之间,细胞存活率接近100%。在相同的孵育时间内,随着磷灰石NP浓度的增加,细胞活力呈下降趋势,结果表明细胞活性呈显著的浓度依赖性。因此在本文的实验中,磷灰石NP其最佳浓度为1 mg/ml。(2)通过荧光染料羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(Carboxyfluorescein succinimidyl amino ester,CFSE)和碘化丙啶(Propidium iodide,PI)来还原磷灰石NP介导海藻糖进入细胞的过程,以及我们使用海藻糖(0-200 mM)和磷灰石NP(1 mg/mL)的培养基处理细胞6小时来计算海藻糖的加载效率,结果显示,NP+PI组在1小时或6小时内显示出显着的红色荧光。细胞内海藻糖浓度大于细胞外海藻糖浓度(高达237±8.5 mM),海藻糖在磷灰石NP的帮助下有效地在细胞内递送,负载效率高达(137.3±34.5)%。(3)通过荧光显微镜成像技术和流式细胞技术来反应冻存细胞后的细胞活力,使用细胞增殖-毒性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)测量冻存细胞的细胞功能。结果显示,在培养基中添加磷灰石NP会显着增加HA-VSMC的冷冻存活率,高达83.6%(与不含磷灰石NP的对照相比改善了30%),其冻存水平与传统的二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide,DMSO)冷冻保存方案相当。在检测冻存后细胞功能方面,NP+Tre组的冷冻保存附着效率较高(69.6±2.9)%,结果令人满意。结论(1)磷灰石NP具有较高生物相容性和低细胞毒性,适合用作介导海藻糖进入组织细胞的媒介。(2)磷灰石NP在较短的时间内可以介导足够量的海藻糖进入组织细胞。(3)磷灰石NP介导海藻糖的细胞内递可以增加冷冻保存细胞的存活率。该方法提供了用于增强冷冻保存的组织细胞活性的新选择。
其他文献
共识算法作为区块链技术体系最为重要的一部分,对区块链技术的安全性、容错性和吞吐量有很大的影响,是区块链系统性能提升的关键所在。实用拜占庭容错算法针对原始拜占庭容错算法效率低的问题进行了改进,使得拜占庭容错问题在实际中应用成为可能。但是,算法存在时间复杂度较高的问题,并且随着系统中节点的增多,算法性能迅速下降。并且共识算法通常采用选举主节点广播区块的方式来达成共识,但采用何种方式对主节点的收益进行分
深度学习是人工智能领域的一个热门话题,它在许多领域都取得了巨大的成功,如图像识别、语义分割、自然语言处理等。然而,有研究表明深度学习容易受到对抗样本的影响。这些人眼难以察觉的对抗样本能够让深度神经网络以高置信度给出错误的结果。对抗样本的存在给深度学习的安全性带来了巨大的威胁,因此,提高深度学习模型的鲁棒性有着重要的实际意义。近几年,国内外关于如何防御对抗样本做了大量的研究。对抗样本防御方法一般分为
侧脑室穿刺引流(External Ventricular Drain,EVD)又称脑室造口术或室外引流,是神经外科临床中常用的手术方法之一,也是医生必须熟练掌握的基本技能,可用于治疗多种颅内疾病
海外汉学著作是一扇窗口,人们能从西方的视角重新审视历史上的中国。汉学著作的翻译给人们提供了再次了解中国的契机。Science and the Dao是当代美国著名汉学家孔丽维(Livia Kohn)所写的一本学术著作。该书从现代科学的角度探讨了道家的宇宙观、人世观、养生观等等。本次翻译的项目材料来源于该书的第三章The Evolution of Humanity-From Chaos to Con
乳腺癌干细胞是第一种在实体肿瘤中发现的肿瘤干细胞,与肿瘤的发生、发展密切相关。目前,细胞粘附因子CD44是公认度最高、研究最为广泛的乳腺癌干细胞表面标志物。近年来,多肽以其功能的多样性、良好的生物相容性以及灵活的结构设计等优势在生物传感器构建研究方面应用越来越广泛。其中,结合功能性多肽与纳米材料优势发展而来的多肽纳米探针在生物传感以及相关的生物医学应用中备受关注。同时,电化学分析技术由于灵敏度高、
近年来,我国许多城市开展了数字城市管理系统的建设。现代城市管理信息的突出特点是:城市管理信息量快速增长,信息处理和传输速度加快,信息处理方法更加复杂,信息处理所涉及
云计算具有成本低廉、数据管理方便和访问不受地理位置限制等优点,能为海量数据的传输、存储和使用提供新的模式,因此得到了学术界和产业界的广泛关注.但随之而来的是一系列的云安全问题,如密文数据的访问控制、搜索、审计和去重等.为此,许多服务于云计算的密码原语被提出,其中属性基加密由于能够实现细粒度和非交互式访问控制,被认为是最适合云环境的加密体制之一.属性基加密虽然能够保证云存储中数据的机密性并实现灵活的
目的:木犀草素是一种黄酮类化合物,被证实具有抗肿瘤作用。然而,木犀草素的抗癌机制仍不明确。本研究旨在探讨木犀草素在乳腺癌中的作用,并揭示木犀草素抑制乳腺癌细胞生长和诱导细胞凋亡的可能机制。材料和方法:MTT法检测木犀草素对MDA-MB-231和Bcap37细胞增殖的影响,计算IC50。克隆形成和Transwell小室实验观察木犀草素对MDA-MB-231和Bcap37细胞增殖和迁移能力的影响。流式
改革开放四十年来,经济高速发展的同时也使得环境质量问题日益严重,目前我国尤其是工业城市面临十分严峻的大气污染问题。实现大气数据分析和空气质量预测对环境保护部门制定政策进行空气污染治理有着重要的支撑作用。现阶段的空气质量在线监测平台仅包含简单的数据报表功能,无法有效利用环境保护部门积累的海量空气质量数据和气象因子数据进行深层次的数据分析和挖掘。现有的数据预测模型存在复杂度高、训练模型使用大气数据来源
数字化改革是浙江立足新发展阶段、贯彻新发展理念、构建新发展格局的重大战略举措，是全面深化改革的总抓手。全省数字化改革大会和全省人大数字化改革工作推进会召开以来，各级人大统一思想、迅速行动，统筹推进改革各项工作，努力打造数字人大工作新名片。 吹响人大数字化改革新号角 2021年春节上班后，全省数字化改革大会和全省人大数字化改革工作推进会相继召开，吹响了全面推进我省人大数字化改革工作的新号角。