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酪蛋白经水解制得的多肽是一种重要的生物活性肽,具有免疫调节能力。本研究分别利用胰蛋白酶及胃蛋白酶酶解酪蛋白,制备两种不同的酪蛋白水解多肽,以家兔为实验动物,分别将两种多肽通过口服,腹腔注射和静脉注射途径给药,依次给药处理3h,2h,2h后取血分离血清,用ELISE方法测细胞因子IL-1β、IL-1Ra、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12、IFN-γ、TNF-α、TGF-β含量的变化,并研究了在一种作用方式下不同浓度(20mg/kg、40mg/kg、60mg/kg、80mg/kg和100mg/kg)的胰蛋白酶酪蛋白水解多肽对家兔细胞因子的影响;同时,首次以人体为研究对象,研究了口服低剂量(30g/天)、中剂量(40g/天)和高剂量(50g/天)酪蛋白复合多肽对32种细胞因子的作用,此外,研究了早中晚口服酪蛋白复合多肽对手少阳三焦经液门、中渚、外关、天井、耳门和翳风六个穴位温度,初步探索酪蛋白复合多肽的归经问题。
家兔实验结果表明,胰蛋白酶水解酪蛋白多肽各种作用方式IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、TGF-β在家兔体内的含量都明显上升,而IL-1β、IL-1ra、IL-12、IFN-γ的含量降低,结果还发现三种不同的给药方式对家兔细胞因子产生的刺激强度不同,即腹腔注射给药组>尾静脉给药组>口服组。说明酪蛋白水解肽通过肠粘膜系统对细胞因子网络起着重要的调节作用。腹腔注射方式下,不同浓度胰蛋白酶水解酪蛋白多肽对细胞因子影响呈剂量依赖性,低浓度对细胞因子的刺激比较弱,随着浓度的增加,作用越明显。胃蛋白酶酶解酪蛋白多肽在三种途径作用下TGF-β、IL-6、IL-1β、INF-α、IL-10、IL-12、IFN-γ分泌量增多(p<0.05),实验组IL-1ra、IL-4的浓度都低于对照组,(p<0.05),且经腹腔注射后作用高效果显著(p<0.01)。人体实验结果表明,低剂量组、中剂量组和高剂量组口服酪蛋白复合多肽后,早中晚外关,天井,耳门穴位温度的作用比较明显。人体细胞因子检测结果表明,酪蛋白复合多肽口服后上调了IL-1β,IL-6,IL-12(p70),IL-13,FGF,Eotaxin,IP-10,MCP-3的表达量,其余细胞因子的浓度均下降。变化显著的细胞因子:GRO(p<0.001),MIP-1β和IL-1ra(p<0.01),EGF,INF-α,TGF-α,IL-2和GM-CSF(p<0.05)。酪蛋白复合多肽通过肠粘膜系统发挥作用,分泌合成细胞因子,激活免疫细胞,增强机体的免疫调节能力。