论文部分内容阅读
第一部分MRI、mPET/CT评估SD大鼠MCAO模型的应用价值目的：参照改良Zea-Longa线栓法制备SD大鼠右侧大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)脑缺血模型。运用MRI、mPET/CT评估SD大鼠MCAO模型,分析SD大鼠脑缺血0.5h-12hADC值变化规律,探讨DWI与mPET/CT对脑缺血的敏感性。材料与方法：健康SD大鼠49只。预实验3只,正式实验46只,随机分为缺血组36只,对照组10只。预实验和正式实验缺血组参照改良Zea-Longa线栓法制作SD大鼠右侧MCAO模型,对照组曝露右侧颈总动脉后缝合颈部组织。缺血组分MRI组和mPET/CT组进行影像检查。MRI组线栓放置成功后0.5h、1h、2h、4h、6h、 8h、12hMRI扫描(扫描序列为DWI、T2WI、FLAIR、T1WI),测定缺血灶ADC值。mPET/CT组、对照组术后0.5h行18F-FDG头部mPET/CT显像,术后12h进行MRI检查。测定mPET/CT检查组缺血区、左侧半球及对照组右侧大脑半球SUVmean值。数据采用SPSS13.0软件统计处理。统计MRI组术后0.5hDWI序列阳性的SD大鼠0.5h-12h的ADC值,绘制ADC值-时间回归曲线,并进行假设检验,以P<0.05方程成立。统计mPET/CT组脑缺血区、左侧大脑半球感兴趣区SUVmean值,进行t检验分析；mPET/CT组与对照组大鼠右侧大脑半球SUVmean值,进行t检验分析,P<0.05有统计学意义。实验组SD大鼠术后0.5h小时MRI组与mPET/CT组定性资料作四格表Fisher确切概率法x2检验,P<0.05有统计学意义。预实验组、缺血组造模成功标准为线栓放置2.2±0.3cm,且SD大鼠存活6h以上并术后12hMRI检查DWI、T2WI、FLAIR序列上右侧大脑半球大脑中动脉供血区均见高信号。全部大鼠参照Longa的5级分级法进行神经系统功能评分。MRI组、mPET/CT组、对照组术后12hMRI检查后各选10只断头取脑,每组5只做TTC染色,5只做HE病理染色。病理图片由病理科副主任医师诊断。结果：预实验组造模成功1只,成功率33.3%。实验组5只于造模术中或术后0.5h内死亡造模成功31只,成功率为86.1%。MRI组SD大鼠21只。DWI序列：术后0.5h见18只SD大鼠右侧大脑半球信号增高,术后1h见20只SD大鼠右侧大脑半球信号增高,术后2h、4h、6h、8h、12h均见21只SD大鼠右侧大脑半球信号高信号。FLAIR、T2WI序列：术后4h见12只SD大鼠右侧大脑半球信号增高,术后6h见15只SD大鼠右侧大脑半球信号增高,术后8h可见19只SD大鼠右侧大脑半球信号增高,术后12h可见21只SD大鼠右侧大脑半球信号增高。T1WI序列：1只SD大鼠术后12h见右侧大脑半球稍低信号。MRI组0.5hDWI序列阳性的18只SD大鼠右侧大脑高信号区0.5h、1h、2h、4h、6h、8h、12hADC值(单位mm2/106s)分别为480.15±21.46、450.81±17.44、418.17±18.33、385.67±19.55、357.15±19.74、332.30±25.34、308.07±22.59。绘制ADC值-时间回归曲线方程为y=-14.372x+459.113,r=0.912, P<0.05,回归方程成立,缺血12小时内ADC值呈下降趋势。mPET/CT组10只SD大鼠18FF-FDG头部mPET/CT显像,右侧大脑半球摄取减低或存在显像剂摄取缺损区,SUVmcan为2.31±0.35,左侧半球SUVmcan3.63±0.40,术后12hMRI可见相应右侧大脑高信号(DWI、FLAIR、T2WI)。对照组术后0.5h做mPET/CT双侧半球显像未见摄取异常,右侧半球SUVmean为3.71±0.38,术后12hMRI检查未见异常信号。mPET/CT组SD大鼠缺血0.5h双侧大脑半球SUVmean值t检验,t=7.74,P<0.05有统计学意义。mPET/CT组与对照组SD大鼠术后0.5h右侧大脑半球SUVmean值进行t检验分析,t=9.32,P<0.05,有统计学意义。MRI组与mPET/CT组术后0.5h定性资料用四格表Fisher确切概率法作x2验,P>0.05,无统计学意义。实验组SD大鼠TTC染色缺血区与12hMRI、0.5hmPET/CT检查缺血区一致。HE染色可见缺血区中心区淡染、呈筛网状,神经细胞变性、坏死,胶质纤维崩解、液化,部分区域呈灶性坏死,缺血边缘区可见散在红细胞及炎细胞浸润。对照组TTC染色、HE染色未见异常。结论：1、线栓法可建立稳定可靠的SD大鼠MCAO模型。2、MRI检查可用于大鼠MCAO模型评估和随访观察,缺血0.5h-2hDWI可发现缺血灶,0.5h-12hADC值呈进行性降低,FLAIR、T2WI序列在缺血后4-12h出现高信号。3、PET/CT检查对SD大鼠脑缺血敏感性高,缺血0.5h即可发现缺血灶SUV值降低。第二部分 SD大鼠死后大脑MRI研究目的：建立MCA0模型后13h-56h内死亡的SD大鼠脑组织进行尸体磁共振(postmortem MRI, PMMRI)扫描,观察梗塞灶死后影像表现,探讨利用影像检查对脑梗塞死亡原因进行诊断的可行性。材料与方法：实验组为改良Zea-Longa线栓法建立的右侧大脑中动脉闭塞(MCAO)模型中评分为3-4分、栓塞后13h-56h死亡的12只SD大鼠。对照组采用过量麻醉剂腹腔注射建立麻醉意外死亡SD大鼠5只。实验组12只SD大鼠右侧大脑中动脉缺血12h活体MRI扫描,对照组过量麻醉后0.5h活体MRI扫描。两组SD大鼠死后放于室温10-15℃、相对湿度45%-55%的环境内,死后8h、24h、48h、72h、96h多次进行头部MRI扫描。测定实验组SD大鼠右侧大脑梗塞区、对侧脑组织ADC值和对照组右侧大脑半球ADC值。实验组SD大鼠于死后8h、24h、48h、72h各取一只老鼠脑组织做HE病理染色,8只于死后96h取出脑组织做HE病理染色观察。对照组5只SD大鼠96h取脑组织做HE病理染色,所有病理图片由病理科主治医师诊断。统计学处理：实验组与对照组SD大鼠死后右侧大脑半球ADC值重复方差分析；实验组SD大鼠右侧半球梗塞灶与左侧半球非梗塞灶死后ADC值做重复方差分析,均以P<0.05有统计学意义。实验组SD大鼠死后8h、24h、48h、72h、96h脑梗塞灶ADC值分别与活体脑梗塞灶ADC值做两两配对t检验。实验组SD大鼠死后8h、24h、48h、72h、96h左侧大脑半球ADC值分别与活体左侧大脑半球ADC值两两配对t检验。对照组SD大鼠死后8h、24h、48h、72h、96h右侧大脑半球ADC值分别与活体右侧大脑半球ADC值两两配对t检验,均以P<0.05有统计学意义。结果：实验组SD大鼠脑梗塞后12h及死亡后8h、24h、48h、72h、96h各时间点扫描可见SD大鼠尸体右侧大脑半球高信号(DWI、FLAIR、T2WI),左侧大脑半球近中线区不同程度信号增高,死后48h、72h、96h高信号区边缘模糊。PMMRI可见8只SD大鼠大脑中线结构左移。对照组MRI扫描未见异常高信号。实验组SD大鼠脑梗塞灶活体(缺血12h)、死后8h、24h、48h、72h、96h ADC值(单位mm2/106s)分别为304.50±19.07、260.83±16.52、209.27±22.73、179.70±27.96、153.89±20.23、135.86±24.19,实验组SD大鼠左侧非梗塞区活体(术后12h)死后8h、24h、48h、72h、96h ADC值(单位mm2/106s)分别为607.50±75.29、352.41±39.50、282.73±32.21、238.60±24.01、197.22±16.32、174.50±21.28。对照组右侧大脑半球活体、死后8h、24h、48h、72h、96h ADC值(单位mm2/106s)分别为626.00±66.49、358.80±42.30、285.20±21.04、246.80±16.89、192.80±11.32、179.20±18.31。实验组与对照组SD大鼠死后右侧大脑半球ADC值重复方差分析,F=39.54,P<0.05,有统计学意义；实验组SD大鼠右侧半球梗塞灶与左侧半球非梗塞灶死后ADC值做重复方差分析,F=42.91,P<0.05。实验组SD大鼠死后8h、24h、48h、72h、96h梗塞灶ADC值分别与活体梗塞灶ADC值做两两配对t检验,t值分别为8.13、13.31、14.36、20.31、19.79,P<0.05,实验组SD大鼠死后8h、24h、48h、72h、96h左侧大脑半球ADC值分别与活体左侧半球ADC值两两配对t检验,t值分别为10.25、12.44、13.98、16.71、18.84、P<0.05；对照组SD大鼠死后8h、24h、48h、72h、96h右侧大脑半球脑组织ADC值分别与活体右侧半球脑组织ADC值两两配对t检验,t值分别为7.32、10.64、16.21、14.66、16.62,P<0.05,有统计学意义。结论：1、SD大鼠脑梗塞13h-56h内死亡,存放于室温10-15℃、相对湿度45%-55%的环境内,死后96h内MRI影像检查DWI、FLAIR、T2WI序列上梗塞灶呈高信号,梗塞脑组织ADC值低于非梗塞脑组织ADC值。MRI检查可用于脑梗塞死亡的虚拟尸解。2、SD大鼠脑梗塞死后8h-96h非梗塞脑组织ADC值低于活体非梗塞脑组织ADC值。SD大鼠脑梗塞死后8h-96h梗塞脑组织ADC值低于活体梗塞脑组织ADC值。SD大鼠麻醉意外死后8h-96h脑组织ADC值低于活体脑组织ADC值。