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目的:本实验的目的是建立一个大鼠鼓室硬化模型。方法:34只SD大鼠被随机分为两组:实验组(n=17)和对照组(n=17)。实验组大鼠左耳鼓室内接种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),右侧耳不予处理。对照组大鼠双侧耳都不予处理。于造模后第1,2,4,6周观察记录实验组和对照组大鼠双侧耳鼓膜变化,并于造模后第6周在HE染色下观察两组大鼠鼓膜及鼓室粘膜的形态学变化。结果:造模后1周,实验组大鼠均存活,无鼓室硬化形成。造模后2周,实验组大鼠因肺部感染死亡1只,余下大鼠中有4耳发生鼓室硬化,均为左耳。造模后4周,实验组大鼠因肺部感染死亡2只,因麻醉过量死亡1只,余下大鼠中有10耳发生鼓室硬化,7耳为左耳,3耳为右耳。造模后6周,实验组大鼠因肺部感染死亡2只,余下大数中有12耳发生鼓室硬化(12/22,54.5%),7耳为左耳,5耳为右耳。对照组大鼠因麻醉过量死亡2只,余15只存活至6周末,均未出现任何异常改变。粘膜增厚、炎性细胞浸润、纤维组织增生以及间质组织增厚等形态学改变不仅可见于实验组接种细菌耳,亦可见于对侧未接种细菌耳。结论:据我们所知,我们第一次发现,大鼠一侧鼓室内接种MRSA模拟鼓室硬化的发生过程中,鼓室硬化也可发生于对侧未接种细菌耳,这一现象与MRSA分泌的外毒素的血液循环作用有关。因此,鼓室内接种MRSA是一种新的构建鼓室硬化动物模型的方法,为探索鼓室硬化的发病机制构建了临床桥梁。目的:本实验的目的是探讨SOST在鼓室硬化中的表达及其在鼓室硬化发病机制中的作用。方法:将石蜡切片分为正常组、左耳钙化组、右耳钙化组和非钙化组,利用免疫组织化学法(IHC)检测SOST、P-ERK1/2、Wnt3a及β-catenin的表达。取一半新鲜中耳组织分为阳性对照组、正常组、左耳钙化组、右耳钙化组和非钙化组,利用蛋白质印迹法(Western blot)检测SOST的表达。取另一半新鲜中耳组织分为正常组、左耳钙化组、右耳钙化组和非钙化组,利用蛋白质印迹法检测P-ERK1/2、Wnt3a及β-catenin的表达。结果:IHC结果显示SOST在实验组和对照组大鼠的鼓膜和鼓室粘膜中均有明显表达,且其表达部位一致,在鼓膜中主要表达于上皮细胞的细胞质中,在鼓室粘膜中主要表达于上皮细胞和腺细胞的细胞质中。P-ERK1/2、Wnt3a及β-catenin在实验组和对照组大鼠中耳组织中均有表达。Western blot检测发现,SOST在钙化组中的表达量比正常组、非钙化组和阳性对照组显著升高(P<0.05),在左耳钙化组和右耳钙化组中的表达量并无统计学差异(P>0.05),且正常组、非钙化组和阳性对照组之间SOST蛋白的表达量亦无统计学差异(P>0.05)。P-ERK1/2、Wnt3a及β-catenin在钙化组中的表达量均比正常组和非钙化组显著升高(P<0.05),在左耳钙化组和右耳钙化组中的表达量并无统计学差异(P>0.05),且正常组和非钙化组之间三种蛋白的表达量亦无统计学差异(P>0.05)。结论:骨硬化蛋白SOST通过ERK1/2-MAPK信号通路介导了鼓室硬化形成过程中的炎症反应,并通过Wnt3a信号通路促进了鼓室硬化的形成。