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研究目的肿瘤是一种免疫疾病,改善和提高患者免疫力是肿瘤治疗的重要方向。多数肿瘤患者NK细胞数目减少,NK细胞是非特异性免疫应答的核心细胞,NK细胞表面的NKG2D配体通路在抗肿瘤免疫应答中发挥着重要的作用。放射治疗中产生的电离辐射对NK细胞的杀伤能力的影响和机制尚不清楚。EGFR抑制剂(西妥昔单抗)对口腔鳞癌患者免疫功能的研究也较少。本研究通过探讨电离辐射和EGFR抑制剂(西妥昔单抗)对口腔鳞癌细胞系SCC25表面NKG2D配体表达的影响,为口腔鳞癌的放疗联合EGFR抑制剂增强NK细胞治疗提供实验支持。研究方法1.流式细胞术检测临床患者放疗前后外周血淋巴细胞各亚型数目变化,CCK8试剂盒检测NK细胞的杀伤能力跟NK细胞比例的关系。2.PCR技术检测SCC25电离辐射前后24h NKG2D配体m RNA的表达情况;流式细胞术检测EGFR抑制剂处理后肿瘤细胞表面NKG2D配体的变化。3.CCK8试剂盒和LDH乳酸脱氢酶释放实验检测电离辐射和EGFR抑制剂处理后NK细胞对SCC25的杀伤能力。研究结果1.临床口腔肿瘤患者放疗后外周血NK细胞在放疗后外周血中的比例是增高的。CCK8实验显示NK细胞可以显著杀伤SCC25,且NK细胞比例越高,对SCC25杀伤作用就越强。2.SCC25接受2Gy电离辐射后,NKG2D配体m RNA表达量有不同程度的增加,其中MICB表达量增加显著,且在一定时间内达高峰。3.NK细胞与EGFR抑制剂均可以显著杀伤SCC25;电离辐射、EGFR抑制剂和NK细胞三者共同作用时,对SCC25的杀伤作用最为显著。研究结论1.患者放疗后外周血CD4+T细胞和CD8+T细胞等数目均下降且比例降低,可NK细胞在放疗后外周血中的比例是增高的;NK细胞比例越高,对肿瘤细胞杀伤能力越强。2.电离辐射和EGFR抑制剂均能使SCC25表面NKG2D配体表达量有所增加。3.电离辐射、EGFR抑制剂和NK细胞三者共同作用时,对SCC25的杀伤作用最为显著。4.电离辐射联合EGFR抑制剂可能通过提高肿瘤细胞表面的NKG2D配体表达,从而增强NK细胞对口腔鳞癌细胞的杀伤作用。