研究背景动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是一个多因素导致的病变,能够导致血管损伤和心血管疾病,是临床上导致急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)的主要病因,是世界范围内主要的死亡原因。传统观念认为,动脉粥样硬化是一个复杂的炎症过程,是炎症导致的动脉粥样硬化的发生发展。然而,医学界越来越多的证据表明,动脉粥样硬化的最初病变不仅仅是内皮下低密度脂蛋白的被动沉浸,不仅仅是一个炎症过程,而是一个更复杂的过程,它还涉及细胞和体液中的天然免疫和适应性免疫。心血管事件的增加和AS斑块的形成与发展密切相关。因此,探讨AS斑块发生的机制,寻找促进AS斑块形成的可能因子,从而抑制这种基因,能够预防AS斑块形成。黑色素瘤缺如因子2(absent in melanoma 2,AIM2)是2009年发现的调控细胞死亡与炎症的炎症小体,属于扰素诱导的HIN-200家族蛋白;AIM2的命名源自此蛋白在黑色素瘤中表达缺失。作为炎症小体的成员,AIM2是动物体内普遍存在的参与生理和病理过程的细胞因子之一,调节细胞的炎症、迁移、增殖和死亡。AIM2是细胞质中的双链DNA(dsDNA)感受器,在机体抵抗细菌和病毒(如弗朗西斯菌和牛痘病毒)的免疫过程中起到十分重要的作用。既往研究发现,当感染弗朗西斯菌后,免疫细胞能够激活转录因子干扰素调节因子1(interferon regulator factor,IRF1),而IRF1能够进一步产生干扰素诱导的GTP激酶鸟苷酸结合蛋白。鸟苷酸结合蛋白能够在细胞质中杀死细菌,从而导致细菌释放DNA并与AIM2结合。识别dsDNA后,AIM2能够招募受体蛋白apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD(ASC)从而形成炎症复合体,炎症小体能够活化caspasel蛋白,分裂为有活性的Caspasel p10和Caspase 1 p20。Caspasel是一种半胱氨酸蛋白酶,而活化的Caspasel能够诱导细胞死亡以及细胞质中IL-1β、IL-18的释放和激活。从结构分析,AIM2的HIN200结构域能够识别dsDNA,而prin结构域能够招募ASC。在牛皮癣患者中发现,DNA在角化细胞的累积能够激活AIM2炎症小体,从而导致IL-1β释放,因此,AIM2能够识别细胞释放的损伤相关分子,并且AIM2的活化能够协助清除病原体从而维持机体自身免疫的平衡和稳态。近期的研究发现,AIM2不仅在固有免疫中发挥着重要作用,还能接受多种PAMPs和DAMPS的刺激,在很多非免疫系统同样发挥着重要作用。另有研究发现AIM2在系统性红斑狼疮、心肌炎、牛皮癣、肝脏缺血再灌注损伤等多种疾病中表达升高。最新研究发现,取人的颈动脉斑块做组化后,可以看到AIM2表达增加,体外使用TNF-α刺激人颈动脉血管平滑肌细胞后,可使AIM2表达显著升高,并可诱导细胞中炎症小体的激活,进而增加caspasel的表达。基于上述研究,我们推测AIM2可能影响了 AS形成的炎症反应,进而影响冠状动脉粥样硬化的发生发展。研究目的(1)在动脉粥样硬化小鼠模型中,探究AIM2对动脉粥样硬化形成的影响;(2)在动脉粥样硬化小鼠模型中,探究AIM2对平滑肌细胞迁移和平滑肌焦亡的作用;(3)在动脉粥样硬化小鼠模型中,研究AIM2对炎性介质的作用。研究方法动脉粥样硬化斑块形成模型将 100 只 8 周龄雄性 Apolipoprotein E-Deficient Mice(ApoE-/-)小鼠随机分为5组(每组20只):对照组(control组)、高脂饮食组(HFD组)、高脂饮食+AIM2过表达慢病毒组(1vAIM2组)、高脂饮食+AIM2干扰慢病毒组(shAIM2组)及高脂饮食+空载体慢病毒组(NC组)。使用不添加胆固醇的基础饮食喂养Control组。其余4组使用含有0.25%胆固醇和16脂肪的高脂饮食喂养。适应性喂养一周后,尾静脉注射慢病毒,慢病毒的浓度为2x107TU/只。继续高脂喂养12周。慢病毒干预:ApoE-/-小鼠适应性喂养一周后,分别给1vAIM2组,shAIM2组及NC组AIM2过表达慢病毒组(1vAIM2)、AIM2-miRNA慢病毒组(shAIM2)及慢病毒空载体组(NC)干预8周。病毒干预2周后,随机抽取1vAIM2,shAIM2,NC组小鼠实施安乐死,立即行冰冻切片检测病毒转染效率。病毒干预12周后,所有小鼠实施安乐死,取材。血清学检测:待实验结束时,小鼠禁食12小时后,从心尖部抽取血液,分别检测血清中低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、TG(triglyceride,甘油三酯)及TC(total cholesterol,总胆固醇)的含量。组织学检测:ApoE-/-小鼠安乐死后,立即取腹主动脉和主动脉根部。腹主动脉行大体油红O染色,主动脉根部行冰冻切片后,行主动脉根部的H&E(hematoxylin-eosinstaining,苏木素-伊红)染色和油红O染色后留取图像。兔疫组织化学利用免疫组织化学的方法,观察IL-1β及AIM2在主动脉根部中的分布。实时定量RT-PCR将冻存的腹主动脉取出后,利用实时定量RT-PCR的方法检测小鼠主动脉中AIM2 mRNA表达水平。Western blot将冻存的腹主动脉取出后,提取总蛋白,利用Western blot方法检测血管中AIM2、ASC、pro-caspase-1、caspase-l 及 GSDMD-N、MMP2、ICAM-1 的表达。TUNEL检测利用TUNEL检测斑块组织中,斑块中出现DNA损伤的情况。免疫荧光利用免疫荧光技术观察AIM2,α-SMA在斑块中的分布。数据分析利用SPSS v20.0处理数据,连续变量以均数±标准误来表示。利用单因素方差分析(one-way ANOVA)和Tukey-Kramer post hoc检验比较多组间的连续变量。利用独立样本t检验比较两组间的连续变量。当p<0.05时认为有统计学意义。研究结果小鼠动脉硬化斑块在髙脂饮食 12周可诱导出现大体油红O染色、油红O染色和HE染色显示,高脂喂养后,ApoE-/-小鼠出现斑块形成(p<0.05)。AIM2炎症小体及GSDMD-N在动脉粥样硬化斑块中表达增高与对照组相比,高脂喂养后的ApoE-/-小鼠出现AIM2、ASC、caspase-1及GSDMD-N表达升高(p<0.05)。此外,AIM2 mRNA水平也同样升高(p<0.01)。与 control 组相比,AIM2、ASC、pro-caspase-1、活化的 caspase-1(caspase-1 p10)及GSDMD-N在AS组中表达升高(p<0.05)。AIM2基因过表达沉默不能改善高脂弓引起的代谢异常在高脂喂养组,LDL-C,TC,TG的水平显著高于对照组(p<0.05)。但是AIM2过表达和干扰干预后,血脂水平没有显著改变。基因干预能有效抑制斑块AIM2表达而AIM2过表达慢病毒能有效导致AIM2表达增加与NC干预组相比,shAIM2慢病毒干预后,斑块组织中AIM2的mRNA及蛋白水平明显降低(p<0.05)。此外,血管中ASC,caspase-1 p10和GSDMD-N的表达也明显降低(p<0.05)。NC干预组相比,1vAIM2慢病毒干预后,斑块组织中AIM2的mRNA及蛋白水平明显增加(p<0.05)。同时血管中ASC,caspase-1 p10和GSDMD-N的表达也明显升高(p<0.05)。而免疫组化结果显示,在动脉粥样硬化斑块中,AIM2和IL-1β的表达受到显著影响(p<0.05)。AIM2表达水平的改变能够显著影响动脉粥样硬化斑块的形成与control组比较,HFD组的大体斑块体积,主动脉根部斑块体积均升高(p<0.05),平滑肌和巨噬细胞的含量也显著增加(p<0.05)。将AIM2基因过表达后,斑块体积、平滑肌和巨噬细胞含量显著增加(p<0.05),而将AIM2基因沉默后,斑块体积、平滑肌和巨噬细胞含量显著减少(p<0.05)AIM2表达水平的改变能够显著影响血管平滑肌细胞的死亡与control组相比,高脂喂养能够显著导致血管平滑肌细胞的死亡(p<0.05)。将AIM2基因过表达后,血管平滑肌细胞死亡数目显著增加(p<0.05),而将AIM2基因沉默后,血管平滑肌细胞死亡数目显著减少(p<0.05)AIM2表达水平的改变能够显著影响ICAM-1和MMP2的表达与control组相比,高脂喂养能够显著增加ICAM-1、MMP-2的表达(p<0.05)。AIM2表达增加后,ICMA-1、MMP-2的表达显著增加(p<0.05),而AIM2沉默后,ICAM-1和MMP-2的表达显著减少(p<0.05)。研究结论(1)在实验性动脉粥样硬化斑块形中AIM2表达增加;(2)AIM2促进了动脉粥样硬化斑块的发生;(3)AIM2增加了血管平滑肌细胞和巨噬细胞的聚集;(4)AIM2促进了血管平滑肌细胞死亡;(5)AIM2 促进了 MMP-2 和 ICAM-1 的表达。动脉粥样硬化过程中的细胞死亡和炎症发生已被广泛研究。很多研究小组已经证明了动脉粥样硬化过程中细胞死亡和炎症之间的联系,其他研究小组则假定凋亡和胞吐受损(凋亡细胞的有效清除)是导致病变细胞炎症和死亡的主要原因。然而,最近有研究发现,人动脉硬化斑块中的细胞死亡是经历了细胞溶解,而不是细胞凋亡。在病变组织中,凋亡的信号前体caspase-3很少表达。值得注意的是,斑块破裂与caspase-1的强免疫反应有关,而caspase-1在动物和人类动脉粥样硬化斑块中大量表达,而且与动脉粥样硬化斑块的不稳定性密切相关[19,22-24]。焦亡仅依赖于caspasel的活化。最近的研究表明,细胞焦亡过程中可以通过端脱氧核苷酸转移酶(Tdt)介导的dUTP-生物素缺口末端标记(TUNEL)染色来进行检测,而这一技术在传统意义上是细胞凋亡的标志。因此,越来越多的证据表明细胞焦亡,一种caspasel依赖的细胞死亡,在动脉粥样硬化斑块发生和不稳定性中发挥着重要作用。AIM2是细胞质中的双链DNA(dsDNA)感受器,在机体抵抗细菌和病毒(如弗朗西斯菌和牛痘病毒)的免疫过程中起到十分重要的作用[29-32]。既往研宂发现,当感染弗朗西斯菌后,免疫细胞能够激活转录因子IRF1,而IRF1能够进一步产生干扰素诱导的GTP激酶鸟苷酸结合蛋白[33]。鸟苷酸结合蛋白能够在细胞质中杀死细菌,从而导致细菌释放DNA并与AIM2结合[34,35]。识别dsDNA后,AIM2能够招募apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD(受体蛋白ASC)从而形成炎症复合体,炎症小体能够激活caspasel并使之分裂为有活性的Caspasel plO和p20。Caspasel是一种半胱氨酸蛋白酶,活化的CaspaselplO和p20能够诱导细胞死亡以及细胞质中丨L-lp、IL-18的释放和激活。从结构分析,AIM2的HIN200结构域能够识别dsDNA,而prin结构域能够招募ASC。在牛皮癣患者中发现,DNA在角化细胞的累积能够激活AIM2炎症小体,从而导致IL-1P释放,因此,AIM2能够识别细胞释放的损伤相关分子,并且AIM2的活化能够协助清除病原体从而维持机体自身免疫的平衡和稳。血管平滑肌细胞(VSMC)早期的积累导致内膜增厚早于泡沫细胞形成,可能由于活化的内皮细胞产生的血小板源性生长因子(PDGF)所致[38]。事实上,VSMC导致动脉粥样硬化的多级反应以往并未得到正确评价。其他危险因素能够导致内皮细胞进一步激活。一旦内皮细胞活化,早期的过程本质上可以描述成早期的免疫反应。活化的内皮细胞能够产生粘附分子,比如E-选择素,P-选择素,和血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)和趋化因子MCP-1。单核细胞和可能的中性粒细胞这类炎性细胞能够早期宽松集合内皮细胞,并进入到内皮下空间。单核细胞转变为巨噬细胞,并能够和病原体相关分子模型(PAMPs),损伤相关分子模型(DAMP)和包括肿瘤坏死因子(TNF-a),白介素(IL)-1和IL-6在内的多种细胞因子相互反应并进一步活化。T-辅助l(Thl)细胞分泌干扰素-y(IFN-?y)和其他能够促进内源性免疫反应的细胞因子。同时,释放从粘附血小板和活化内皮细胞来源的PDGF(主要是人体A和B亚型的二聚体)。通常,PDGF被认为能够和己分化、能收缩的VSMC反应导致从可收缩向综合表型转换,并向内膜转移[39]。最新研究表明,可能是位于动脉区域的多种血管干细胞一旦和血小板接触能够转换并呈现出VSMC表型[39]。出人意料的,在动物模型中研宂的包括VSMC-样细胞核各种免疫细胞在内的动脉粥样硬化进展已在人斑块中获得证实[40],展现出基因的相似性。但是,ox-LDL是否能够导致血管平滑肌细胞焦亡,而AIM2是否介导了血管平滑肌细胞的焦亡,国内外尚未见报道。研究目的:1、Ox-LDL能否导致血管平滑肌细胞焦亡;2、Ox-LDL促进AIM2表达的可能机制;3、AIM2能否介导ox-LDL导致的血管平滑肌细胞焦亡。研究方法基因沉默技术根据siRNA原则,经公司设计3条干扰序列,转入细胞后观察对AIM2的干扰效果,选出干扰效果最强的干扰序列,最终构建pLenti6.3—EmGFP-AIM2-miRNA慢病毒载体,构建出AIM2干扰慢病毒。细胞培养血管平滑肌细胞(VSMC)在高糖的含10%胎牛血清的DMEM培养基中培养。在37°C恒温恒湿孵育箱中培养。慢病毒干预血管平滑肌细胞在6孔板种板后,分别给lvAIM2组,shAIM2组及NC组AIM2过表达慢病毒,AIM2-miRNA慢病毒及慢病毒空载体(NC)干预72小时。Western blot提取细胞蛋白,利用Western blot方法检测血管中AIM2、ASC、pro-caspase-1、caspase-1及GSDMD-N的表达。TUNEL检测利用TUNEL检测血管平滑肌细胞中出现DNA损伤的情况。免疫荧光利用免疫荧光技术观察AIM2,Caspase 1在斑块中的分布。数据分析利用SPSS 20.0处理数据,连续变量以均数土标准差来表示。利用单因素方差分析比较多组间连续变量,利用独立样本t检验比较两组间连续变量。以p<0.05时认为有统计学差异研究结果氧化低密度脂蛋白能够导致AIM2炎症小体及GSDMD-N表达升高与对照组相比,ox-LDL刺激后的血管平滑肌细胞AIM2、ASC、caspase-1及GSDMD-N表达升尚(p<0.05)。与control组相比,AIM2、ASC、pro-caspase-1、活化的caspase-1(caspase-l plO)及GSDMD-N表达升高(p<0.05)。Ox-LDL能够导致血管平滑肌细胞发生焦亡与对照组相比,ox-LDL刺激后的血管平滑肌细胞TUNEL和EthD-III结果升高。(p<0.05)Ox-LDL能够通过NF-kB信号通路影响AIM2的表达当不同浓度刺激VSMCs后,U B a磷酸化和NF-k B(p65)细胞核表达增加(p<0.05)。当使用NF-k B的抑制剂BAY11-7082和SC-514后,AIM2的表达被抑制(p<0.05)。基因干预能有效抑制血管平滑肌细胞A1M2表达而AIM2过表达慢病毒能有效导致AIM2表达增加与NC干预组相比,AIM2-miRNA干预后,血管平滑肌细胞AIM2的表达也明显降低(p<0.05)。而W-AIM2干预后,血管平滑肌细胞中的AIM2显著升高(p<0.05)。A1M2能够影响炎症小体和GSDMD-N的表达与NC干预组相比,AIM2-miRNA干预后,血管平滑肌细胞ASC、procaspasel,GSDMD-N的表达也明显降低(p<0.05)。而lv-AIM2干预后,血管平滑肌细胞种的ASC、pro-caspasel,GSDMD-N显著升高(p<0.05)。AIM2表达水平的改变能够显著影响平滑肌细胞的死亡与control组相比,氧化低密度能够显著导致血管平滑肌细胞的死亡(p<0.05)。将AIM2基因过表达后,血管平滑肌细胞死亡数目显著增加(p<0.05),而将AIM2基因沉默后,血管平滑肌细胞死亡数目显著减少(p<0.05)研究结论(1)ox-LDL能够导致血管平滑肌细胞焦亡;(2)ox-LDL能够通过NF-k B导致血管平滑肌细胞中AIM2表达升高;(3)AIM2介导了氧化低密度导致的血管平滑肌焦亡;动脉粥样硬化(AS)能够导致患者面临致命性和非致命性的冠状动脉血管(cardiovascular,CV)事件的发生。AS除了能增加脑血管意外的风险外,也能够导致CAD患者心肌梗死(myocardial infarction,MI)和冠状动脉死亡事件增力口。在对包含11391名患者在内的17个研究进行分析后发现,超过50%的患者有无症状性颈动脉狭窄,63%的后期死亡事件是心脏事件,平均心脏性死亡风险每年增加2.9%。许多研究表明,即使在常规危险因素调整后,有症状或无症状的患者的死亡率、心血管病死亡率和发病率也有增加的风险。踝肱指数(anklebrachial index,ABI)彡0.9能够导致冠状动脉事件、CV的十年风险和全因死亡率增加2倍以上。5年后,20%的患者将患有间歇性跛行,而心梗或卒中的死亡率将达到10-15%。所有这些研究结果均表明探宄动脉粥样硬化的发生,从而寻找有效的防治靶点,对预防心血管疾病十分重要。既往研究表明,在晚期动脉粥样硬化斑块中,血管平滑肌细胞(VSMC)的存在是有益的和保护性的,因为它在纤维帽的形成和维持中起着关键作用,富含VSMC的纤维斑块能够保护晚期斑块免受斑块破裂和血栓形成。与此相反的,动脉硬化斑块的形成和VSMC的存在密切相关。动脉粥样硬化斑块形成于动脉血管内许多特殊的部位,这些部位被称为“动脉粥样硬化易感区”,这些部位在动物和人的动脉粥样硬化是共有的。当内皮细胞暴露于这些血流动力学改变时,其功能发生紊乱,并以内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达受损为特征。一氧化氮(NO)生物利用度的降低促进了多种促动脉粥样硬化的作用,包括血小板粘附和聚集增加,单核细胞粘附/浸润,聚集的脂蛋白的氧化修饰和血管收缩。此外,NO水平的降低可导致基质金属蛋白酶(MMPs)的表达增加,并发挥对VSMCs促进迁移的作用。在小鼠模型中,单核/巨噬细胞聚集是动脉粥样硬化形成的第一个可见征象,而在人类中,新生动脉粥样硬化形成的先发征象是适应性内膜增厚。这是一个正常的发生过程,其特征是嵌入在富含蛋白质的细胞外基质中的VSMCs在斑块中积聚,这通常是在血流动力学改变的部位。动脉粥样硬化病变形成的早期形态,称为病变内膜增厚,与VSMCs及其细胞外基质的形态学和生化改变有关。这种改变包括脂质蛋白沉积后的保留和修饰,VSMC提取修饰的脂蛋白,平滑肌凋亡,巨噬细胞浸润,微钙化的存在以及脂质核心的形成。虽然确切的机制尚未清楚,但这些初始的病理过程能够更好地解释脂质/坏死核是如何形成和扩展到晚期不稳定斑块的。我们还是可以从动脉粥硬化模型中获得一定的认知,以阐明VSMC对斑块进展的贡献。因此研究血管平滑肌细胞的病理过程,成为现在研究的热点。血管平滑肌的迁移有助于动脉粥样硬化早期病变的发展,但是同样重要的是通过维持一个保护性的纤维帽覆盖在高级病变的血栓脂质核上,从而维持斑块的稳定性。因此了解动脉粥样硬化不同阶段血管平滑肌细胞生长的关键调控因子,有助于未来调节疾病进程的策略。基质金属蛋白(MMPs)与血管平滑肌细胞的生长和动脉粥样硬化病变过程有着不可忽视的联系。特别是,MMP-2己经被证明起着重要作用,它可以促进早期病变的发展,同时防止晚期斑块的形成。MMPs调节VSMCs的行为一种公认的机制是调节细胞-细胞和细胞-基质的相互作用,从而影响血管平滑肌细胞的迁移。AIM2是细胞质中的双链DNA(dsDNA)感受器,在机体抵抗细菌和病毒(如弗朗西斯菌和牛痘病毒)的免疫过程中起到十分重要的作用。既往研究发现,当感染弗朗西斯菌后,免疫细胞能够激活转录因子IRF1,而IRF1能够进一步产生干扰素诱导的GTP激酶鸟苷酸结合蛋白。鸟苷酸结合蛋白能够在细胞质中杀死细菌,从而导致细菌释放DNA并与AIM2结合。识别dsDNA后,AIM2能够招募受体蛋白ASC(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD)从而形成炎症复合体并激活caspasel。Caspasel是一种半胱氨酸蛋白酶,能够诱导细胞死亡以及细胞质中IL-lp、IL-18的释放和激活。从结构分析,AIM2的HIN200结构域能够识别dsDNA,而prin结构域能够招募ASC。在牛皮癣患者中发现,DNA在角化细胞的累积能够激活AIM2炎症小体,从而导致IL-lp释放,因此:AIM2能够识别细胞释放的损伤相关分子,并且AIM2的活化能够协助清除病原体从而维持机体自身免疫的平衡和稳态。近期的研究热点集中在AIM2的炎症小体外作用,而AIM2对平滑肌的炎症小体外作用尚未见报道但是,而AIM2是否介导了血管平滑肌细胞的迁移,国内外尚未见报道。研究目的:1、ox-LDL导致AIM2升高的机制;2、AIM2能否介导ox-LDL导致的MMP-2水平的升高,进而促进平滑肌迁移;3、AIM2炎症小体外作用的可能机制.研究方法细胞培养血管平滑肌细胞(VSMC)在高糖的含10%胎牛血清的DMEM培养基中培养。在37°C恒温恒湿孵育箱中培养。慢病毒干预血管平滑肌细胞在6孔板种板后,分别给lvAIM2组,shAIM2组及NC组AIM2过表达慢病毒,AIM2-miRNA慢病毒(AIM2_miRNA)及慢病毒空载体(vehicle)干预72小时。Western blot提取细胞蛋白,利用Western blot方法检测血管中AIM2、MMP2、TGF、SMAD2,p-SMAD2,SMAD3,p-SMAD3的表达。Transwell检测利用Transwell检测血管平滑肌细胞迁移情况。免疫荧光利用免疫荧光技术观察AIM2在血管平滑肌细胞中的表达。数据分析利用SPSS V20.0处理数据,连续变量以均数土标准误来表示。利用单因素方差分析(one-way ANOVA)和Tukey-Kramer post hoc检验比较多组间的连续变量。利用独立样本t检验比较两组间的连续变量。当p<0.05时认为有统计学意义研究结果氧化低密度能够导致AIM2表达升高与对照组相比,ox-LDL刺激后的血管平滑肌细胞AIM2表达升高(p<0.05)。ox-LDL导致平滑肌中AM2的升高呈时间依赖性(p<0.05)。氧化低密度能够通过ROS影_A1M2表达与对照组相比,ox-LDL刺激ROS升高,而使用NAC抑制后,ROS明显降低(p<0.05)。而使用NAC干预后,AIM2的表达明显被抑制(p<0.05)。基因干预能有效抑制血管平滑肌细胞AIM2表达而AIM2过表达慢病毒能有效导致AIM2表达增加与NC干预组相比,AIM2-miRNA干预后,血管平滑肌细胞AIM2的表达也明显降低(p<0.05)。而W-AIM2干预后,血管平滑肌细胞种的AIM2的表达明显升高(p<0.05)。AIM2表达水平的改变能够影响MMP-2的表达与NC干预组相比,AIM2-miRNA干预后,血管平滑肌细胞MMP-2的表达也明显降低(p<0.05)。而丨V-AIM2干预后,血管平滑肌细胞种的MMP-2的表达明显升高(p<0.05)。AIM2表达水平的改变能够显著影响TGF-/SMAD2/3信号通路将AIM2基因过表达后,血管平滑肌细胞TGF-员的表达水平,SMAD2和SMAD3的磷酸化水平显著增加(p<0.05),而将AIM2基因沉默后,TGF-0的表达水平,SMAD2和SMAD3的磷酸化水平显著减少(p<0.05)A1M2表达水平的改变能够显著影响血管平滑肌细胞的迀移将AIM2基因过表达后,血管平滑肌细胞迁移数目显著增加(p<0.05),而将AIM2基因沉默后,血管平滑肌细胞迁移数目显著减少(p<0.05)研究结论(1)ox-LDL能够通过ROS途径导致血管平滑肌细胞AIM2表达升高;(2)AIM2能够促进MMP-2的表达,进而促进血管平滑肌细胞迁移;(3)AIM2可以促进TGF-3/SMAD2,3信号通路的活化;