大黄素对高糖条件下VEGF表达及人视网膜血管内皮细胞增殖的影响

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目的:研究大黄素(Emodin)对高糖条件下人视网膜血管内皮细胞(Human RetinalVascular Endothelial Cells,HRCECs)的增殖是否具有抑制作用,并从其对血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF)表达的影响入手探讨作用机制,从而为糖尿病性视网膜病变(Diabetic retinopathy, DR)的预防和治疗提供新的方法。方法:体外培养HRCECs,并塑造高糖条件下的HRCECs模型。在倒置显微镜下观察细胞的形态。将培养的细胞按照实验设计分组如下(1)对照组:低糖组,高糖组;(2)高糖+不同剂量浓度大黄素组:5mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L、80mg/L组。使用MTT法检测不同剂量浓度的大黄素组作用24h后对HRCECs增殖的抑制率,免疫细胞化学方法分别检测对照组、不同浓度大黄素(10mg/L、40mg/L、80mg/L)组分别作用24h后HRCECs中VEGF的表达。结果:1、MTT法结果显示:不同剂量浓度大黄素作用24h后HRCECs增殖的抑制率分别为8.41%、19.06%、33.26%、46.80%、56.05%,在一定的时间范围内,大黄素可以抑制HRCECs的增殖﹙P<0.05﹚,且呈剂量浓度依赖性。2、免疫细胞化学法结果显示:⑴与低糖对照组相比,高糖对照组VEGF的表达明显增加,灰度值最大(P<0.05);⑵与高糖对照组相比,不同剂量浓度大黄素组作用24小时后VEGF的表达均明显降低,灰度值减少,差异具有统计学意义,同样呈剂量浓度依赖性(P<0.05)。结论:1、大黄素对高糖条件下HRCECs的增殖具有抑制作用,且呈剂量浓度依赖关系;2、高糖能使HRCECs中VEGF的表达增加;3、大黄素对高糖条件下HRCECs中VEGF的高表达具有抑制作用,且呈剂量浓度依赖关系。
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