针刺足三里穴对功能性消化不良大鼠小肠Cajal间质细胞自噬相关蛋白LC3表达的影响

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目的:以功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)大鼠小肠Cajal间质细胞(Interstitial Cell of Cajal,ICC)作为研究对象,通过定量分析ICC中自噬相关蛋白(autophagy-related protein,Atg)LC3的表达情况,探究针刺足三里穴对ICC自噬相关蛋白LC3表达的影响。方法:选用50只SPF等级(specific pathogen free,SPF)的Wistar成年大鼠,雌雄各25只,随机分为5组,包括:正常对照组(A组,n=10),FD模型组(B组,n=10),自然恢复组(C组,n=10),假针刺组(D组,n=10),针刺足三里组(E组,n=10)。A组大鼠自然条件下喂养,整个实验过程中不做任何特殊处理,将B、C、D、E 4组中的40只大鼠作为造模组,用苦寒泻下耗气破气的中药方剂通过灌胃方法建造FD大鼠动物模型。造模结束后采用电针针刺治疗假针刺组D和针刺足三里组E。造模和治疗过程中观察记录各组大鼠的一般生物学行为和体重变化。造模和治疗后检测各组大鼠尿D-木糖排泄率和小肠推进率,然后处死大鼠解剖开腹留取近幽门段小肠作为动物标本用于实验研究。采用Western blot方法定量分析检测各组标本ICC中自噬相关蛋白LC3的表达,探究针刺足三里穴对ICC自噬相关蛋白LC3表达的影响。结果:1.与正常对照组A相比较,造模组B、C、D、E的大鼠小肠Cajal间质细胞(ICC)自噬相关蛋LC3-II/LC3-I的比值均有不同程度的明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);2.在造模组B、C、D、E中,针刺足三里E组大鼠小肠Cajal间质细胞(ICC)LC3-II/LC3-I的比值比B、C、D组明显减少,差异显著有统计学意义(P<0.05);3.FD模型组B、自然恢复组C和假针刺治疗组D的大鼠小肠Cajal间质细胞(ICC)自噬相关蛋白LC3-II/LC3-I的比值相当,无统计学意义的差异(P>0.05)。综合以上结果,LC3-II/LC3-I比值在各组大鼠ICC中的基本趋势为:FD模型组(B组)≈自然恢复组(C组)≈假针刺组(D组)>足三里针刺组(E组)>正常对照组(A组)。结论:1.针刺足三里穴可以降低功能性消化不良大鼠ICC自噬相关蛋白LC3的表达;2.针刺足三里穴可能是通过调控小肠Cajal间质细胞自噬的发生水平来改善或治疗功能性消化不良症状的。
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