人参皂苷（Ginsenosides）是人参的主要有效成分之一，具有抗炎、抗肿瘤、抗氧化等多种药理功能。为了获得毒性更低、生物学活性更强的皂苷类衍生物，本实验对人参皂苷Rh₂进行了化学修饰，得到了具有较好水溶性的两个衍生物单体，暂命名为衍生物B₁（Rh₂-B₁）和衍生物B₂（Rh₂-B₂）。本实验通过建立LPS诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞的体外炎症模型，研究了人参皂苷Rh₂衍生物的体外抗炎活性，借助炎性信号传导通路平台进一步探索了它的抗炎作用分子机制。脂多糖（LPS）可以刺激巨噬细胞产生多种炎性细胞因子和炎性介质，导致多种炎症性疾病的发生。本实验通过建立LPS诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞的体外炎症模型，研究了不同浓度人参皂苷Rh₂衍生物对细胞因子及炎性介质合成和分泌的影响。结果显示，人参皂苷Rh₂衍生物以剂量依赖的方式抑制了RAW264.7细胞中TNF-α、IL-6和IL-1β的分泌水平，提高了IL-10的分泌水平（P<0.05，P<0.01），且与mRNA的表达结果一致。另外，人参皂苷Rh₂衍生物还能抑制NO和PGE₂的分泌，并显著下调诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和环氧合酶-2（COX-2）的mRNA和蛋白表达水平（P<0.05，P<0.01）。以上结果表明，人参皂苷Rh₂衍生物在炎症过程中可能通过调节细胞因子和炎性介质的合成及分泌而发挥其抗炎作用。MAPKs和NF-κB信号传导通路是LPS诱导炎症反应最经典的两条信号通路。其中MAPKs由p38、JNK、ERK1/2三个主要成员组成，它们均参与LPS介导的细胞内信号传导，以及由此导致的细胞生物学反应。另一条信号传导通路NF-κB参与了机体细胞分化与凋亡、免疫反应、炎症反应等过程，该通路一旦被LPS、TNF-α等致炎因素激活，其便可由胞浆迁移至胞核内与靶基因启动子区域的κB位点结合，诱导多种炎症相关基因表达，导致炎症反应发生。本实验通过建立体外LPS诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞模型，分别测定人参皂苷Rh₂衍生物对MAPKs和NF-κB信号传导通路的影响，探究其抗炎的分子机制。结果显示，人参皂苷Rh2衍生物显著抑制了LPS诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞MAPKs信号通路中p38、JNK MAPKs激酶的磷酸化。其中，Rh₂-B₁还抑制了ERK1/2MAPKs激酶的磷酸化（P<0.05，P<0.01）；同时，人参皂苷Rh₂衍生物显著上调了NF-κB通路中p65和IκBα的蛋白表达，并显著下调了p-p65和p-IκBα的蛋白表达，且作用呈剂量依赖（P<0.01）。以上结果说明，人参皂苷Rh₂衍生物通过调控MAPKs和NF-κB通路抑制了细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β和炎性介质NO、PGE2的合成和分泌。本研究发现人参皂苷Rh₂衍生物在体外具有一定的抗炎作用，并在此基础上进一步证实它们通过调控NF-κB、p38、JNK和ERK1/2MAPKs信号通路介导的炎症反应发挥其抗炎作用。研究结果将为人参皂苷Rh₂衍生物在兽医学临床和其他生物学领域的应用提供了可靠的实验数据和理论依据。