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目的:检测不同分期的结直肠癌患者术前外周血T细胞上免疫抑制相关分子的表达状况,分析各指标之间与临床信息的相关性,评价分析患者免疫抑制状态,为结直肠癌免疫靶向药物的应用提供一定的理论基础。方法:本课题第一部分收集昆明理工大学附属医院云南省第一人民医院普外二科2018年11月-2019年2月住院的Ⅰ+Ⅱ、Ⅲ+Ⅳ期结直肠癌患者共20例,对照组18例。抽取患者术前以及对照组的外周静脉血液并抗凝,加入抗体标志物后应用流式细胞仪检测外周血CD8+T细胞上PD-1、2B4、Tim-3、LAG-3、KLRG1、BTLA、CD160、CTLA-4表达水平。第二部分继续收集2019年3月-2019年12月住院的Ⅲ+Ⅳ期结直肠癌患者共17例,抽取患者术前外周静脉血并抗凝,应用流式细胞仪检测外周血中表达PD-1和表达2B4的CD8+T细胞上CD38、HLA-DR、CD69、CD27、CD28等分子的表达水平。结果:1.结直肠癌组与对照组外周血CD8+T细胞上Tim-3、LAG-3、KLRG1、BTLA、CD160的表达情况无显著差异,CD4+T细胞上CTLA-4的表达情况也无显著差异,均无统计学意义（P>0.05）。PD-1、2B4在Ⅲ+Ⅳ期结直肠癌组外周血CD8+T细胞上的表达显著高于对照组:PD-1在对照组外周血CD8+T细胞的表达率为34.95±2.479%,在Ⅲ+Ⅳ期结直肠癌组外周血CD8+T细胞的表达率为47.47±3.954%;2B4在对照组外周血CD8+T细胞的表达率为48.68±4.479%,在Ⅲ+Ⅳ期结肠癌组外周血CD8+T细胞的表达率为66.32±5.984%,差异具有统计学意义（P<0.05）2.晚期结直肠癌组外周血中高表达PD-1和低表达PD-1的CD8+T细胞中CD38+HLA-DR+双阳性的表达率分别为5.80%和2.65%,高表达2B4和低表达2B4的CD8+T细胞中CD38+HLA-DR+双阳性的表达率分别为5.23%和0.93%,差异具有统计学意义（P<0.001）。3.晚期结直肠癌组外周血中高表达PD-1和低表达PD-1的CD8+T细胞中CD69的MCF分别为154和115,高表达2B4和低表达2B4的CD8+T细胞中CD69的MCF分别为158和88,差异具有统计学意义（P<0.001）。4.晚期结直肠癌组外周血中高表达PD-1和低表达PD-1的CD8+T细胞中CD27的MCF分别为405和331,高表达2B4和低表达2B4的CD8+T细胞中CD27的MCF分别为188和853,差异具有统计学意义（P<0.001）。5.晚期结直肠癌组外周血中高表达PD-1和低表达PD-1的CD8+T细胞中CD28的MCF分别为162和140,高表达2B4和低表达2B4的CD8+T细胞中CD28的MCF分别为106和240,差异具有统计学意义（P<0.001）。结论:1.PD-1,2B4在晚期结直肠癌患者外周血CD8+T细胞上呈高表达状态,提示晚期结直肠癌患者的外周CD8+T细胞免疫功能处于抑制状态,且PD-1和2B4可能存在协同作用;2.通过对晚期结直肠癌组外周血中表达2B4和表达PD-1的CD8+T细胞中CD27、CD28的表达量分析,提示2B4高表达的CD8+T细胞可能才是真正的耗竭细胞。3.PD-1/PD-L1阻滞剂在不同实体肿瘤诊疗中取得了可观的疗效,如恶性黑色素瘤、非小细胞肺癌、肾细胞癌等,但对于结直肠道肿瘤的治疗效果甚微。而本实验结果提示,PD-1、2B4对于结直肠癌免疫抑制剂的应用有一定的预测作用,尤其2B4可能为结直肠癌的生物标记物及免疫治疗的新靶点。