磁螺菌Magnetospirillum gryphiswaldense MSR-1中OxyR同源蛋白的功能分析

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:huanle986
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
趋磁细菌是能在胞内合成特殊细胞器—磁小体,并沿磁力线排列和运动细菌的总称。磁小体由四氧化三铁或四硫化三铁纳米磁颗粒及其外包被的生物膜组成,粒径分布在30~120 nm之间。由于趋磁细菌细胞结构和基因组构成简单,是研究生物矿化的模式生物。目前趋磁细菌的研究主要集中于磁小体合成机制,尤其是磁小体岛基因的研究,岛外基因功能及调控机制的研究较少。前期的实验证据表明磁小体的合成与氧化还原密切相关。本工作以格瑞菲斯瓦尔德磁螺菌(Magnetospirillum gryphiswaldense MSR-1)为材料,研究两个oxyR同源基因的功能及调控机制。实验室在前期工作中已经构建了基因oxyR-Like的缺失突变和互补菌株,通过对其一系列表型的测定,发现其磁小体合成严重受阻,并利用表达谱测定了突变株中基因的总体表达情况,但OxyR-Like的调控机制并没有被阐明。本文利用凝胶阻滞(EMSA)和DNaseI足迹实验深入的研究了 OxyR-Like的调控机制。结果表明,OxyR-Like可以结合MGMSRv-20006基因,pdhA基因簇以及mcpA基因的启动子区。利用DNaseI足迹实验找到了 OxyR-Like结合的DNA保守序列5’-ATN{3}AN{5}TTATCA-3’。利用qRT-PCR检测,发现突变株中所有与三羧酸循环相关的基因表达量均下调,暗示在突变株中能量代谢受到抑制。oxyR-4250基因是MSR-1中另外一个oxyR同源基因。本文构建了 oxyR-4250的缺失突变株和互补菌株,并对其表型进行了测定。结果表明,oxyR-4250缺失突变株生长缓慢,完全失去磁感应能力,且铁吸收能力相比野生型菌株下降五倍。通过透射电镜对突变株进行观察,发现在突变株中磁小体数量变少,粒径变小,并且不再成链排列。EMSA实验结果表明,OxyR-4250可以调控ahpC和sodB基因的表达,证明OxyR-4250在MSR-1中可以调控抗氧化基因的表达。但在MSR-1中OxyR-4250并不调控katE,katG等在大肠杆菌中受OxyR调控的基因,说明在MSR-1中其他抗氧化调控机制的存在。通过在EMSA结合体系中加入还原剂,证明了 OxyR-4250可以响应环境中的氧化还原信号,从而改变其DNA结合能力。但EMSA实验并未发现OxyR-4250可以结合磁小体岛基因簇的启动子区,说明OxyR-4250不能直接调控磁小体的合成。DNase I足迹实验证明OxyR-4250结合DNA的保守序列为5’-TCGATTTNTNTNANNANNANAACTCNT-3’。定点突变后的 EMSA 实验结果证明 OxyR-4250蛋白中212Cys在其结合DNA过程中起关键作用。综上所述,本论文首次阐明了磁螺菌MSR-1中两个oxyR同源基因的功能,明确了 OxyR-Like 调控能量代谢相关的基因并与磁小体合成相关;明确了 OxyR-4250 在 MSR-1 中不同于大肠杆菌中的抗氧化调控机制,为胞内氧化还原的调控与磁小体形成直接相关提供了证据。
其他文献
象征蒙太奇作为一种经典的剪辑方式,至今仍被不断运用于影片之中,正是因为它有着在表达故事、深化主题、塑造人物、抒发情感上的特殊作用。本文选取《阿甘正传》、《放牛班的春天》和《甜蜜的生活》三部影片中的意象进行分析,其相同与不同之处都展现了象征蒙太奇在剪辑作用上的独特性,而最为突出的一点则是,其赋予了观众理解影片内涵更大的空间。
传统的超声引导下的肾脏穿刺手术中,超声探头需要专人把持、定位和检测,可能造成手术人员疲惫、手术质量下降等一系列问题。本文针对超声引导下的肾脏穿刺手术全流程,设计了术前人机协作模式,以供超声探头的预定位。术中主从模式,以供主从手实现位置到位置、位置到力的映射。首先,本文根据机械臂结构,建立了正逆运动学模型,并对多解进行选取。针对机器人末端姿态,建立了基于RPY姿态角的正逆表示方法。求解了关节速度到末
体验式学习属于现代新型的学习理论,以建构主义作为理论的核心和基础。建构主义认为,人类学习知识是在原有知识结构上完成对知识经验的积累,通过对新信息的加工处理,完成对知识结构的重建,而建构知识的过程便是学习的过程。体验式学习包含具体体验、反思观察、主动应用、抽象概括四个环节,通过这四个环节完成一个循环的学习,让学习者可以在原有知识基础上实现对新知识框架的重建。
期刊
光伏系统中直流母线电压受光伏发电端及负载影响变化范围较大,传统储能直流变换器难以适应储能侧及母线侧双端宽电压范围运行。该文提出一种适用于储能系统的飞跨电容三电平双向升降压变换器,该变换器具有对称的拓扑结构,能量向任意方向传递时,均可实现升、降压功率变换,从而解决储能系统在宽母线电压工况下的应用问题。此外,该文提出基于所提变换器的模型预测控制(MPC)策略,该策略通过建立电感电流的预测模型,引入电感
一段山区小学的孩子,用架子鼓、贝斯、吉他等乐器,熟练演奏着歌曲《为你唱首歌》,在快手平台上传播,得到盛赞。据报道,视频的拍摄者是贵州六盘水海噶小学一位名叫顾亚的老师,在这所海拔2900米的山区小学,他组建了校园摇滚乐队,带领学生们弹吉他、敲架子鼓,热烈的节奏燃翻了寂静的大山。网友纷纷大呼:"这个视频给我看哭了!"
期刊
《放牛班的春天》这是一部教育意义深刻的电影,本文从影片内容着手,讲述了一位代课教师马修与一群"特殊"孩子之间的故事。马修老师用自己特有的教育方法为少年们此后的人生开启了一扇希望之门。从马修老师刚进入学校时的不适与无措,到关注到每一个孩子发掘他们的闪光处,影片中无处不体现出学校"德育"中的艺术,笔者以此为契机,尝试从这部经典教育电影的视角,来分析马修老师的德育观,以期从中得到一些"教育"与"德育"启
语文课程致力于培养学生的语言文字运用能力,包括识字写字能力、阅读能力、写作能力、口语交际能力等。然而在初中语文教学中,识字写字能力、口语交际能力等常常被弱化或忽略。通过对统编教材和语文实践的研究,本文试图弥补语言文字教学中被忽略的部分,从语音、文字、语法、语文实践方面提出几条教学探索意见。
所有真核生物的生长和繁殖都需要遗传物质的精确传递。遗传物质的传递主要包括染色体的复制和分离。为了确保复制产生的两条姐妹染色单体能被精准地均分到两个子细胞,姐妹染色单体在分离之前必须整齐排布并紧密相连,这个在真核生物中高度保守的重要过程即姐妹染色单体黏连(sister chromatid cohesion,SCC)。该过程与许多其它重要生物学过程密切关联,如细胞周期进程、DNA损伤修复、基因的转录调
《放牛班的春天》讲述的是一名非常有才华的音乐家,由于各种原因来到了一个有很多问题少年的学校任教,这个有才华的音乐家叫作克莱门特·马修。马修来到学校后,经过一段时间的相处,马修发现这个学校校长的教育方法是有问题的,他的教育方式非常残暴。看到了这样的情况,克莱门特·马修通过自己的努力帮助学生们从内心改变自己,克莱门特·马修也是为了实现自己的音乐梦想,因此马修通过自己的努力创建了一个合唱团体。这个
期刊
阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)是重要的工业微生物,其产生的阿维菌素(Avermectins)由于具有高效、广谱和低毒的杀虫活性被广泛应用于农业、畜牧业和医药领域。在阿维链霉菌中,诱导阿维菌素合成的自调节因子信号-avenolide是一种新型的γ-丁烯酰类的小分子,而非常见的γ-丁酸内酯(GBL)类自调节因子。为了阐明阿维菌素生物合成的调控机制,本论文针对阿维链霉菌中