【摘 要】
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目的通过随机、对照临床试验探讨炎调方治疗脓毒症急性胃肠损伤（热结肠腑证）患者的临床疗效及其对Rho/ROCK信号通路的影响;通过基础实验研究探讨炎调方对脓毒症急性胃肠损伤大鼠Rho/ROCK信号通路的调控作用。方法临床研究:将93例符合脓毒症急性胃肠损伤（热结肠腑证）患者随机分为对照组、乌司他丁组与炎调方组:对照组为西医常规治疗,乌司他丁组为西医常规治疗基础上加用乌司他丁,炎调方组为西医常规治疗基
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目的通过随机、对照临床试验探讨炎调方治疗脓毒症急性胃肠损伤（热结肠腑证）患者的临床疗效及其对Rho/ROCK信号通路的影响;通过基础实验研究探讨炎调方对脓毒症急性胃肠损伤大鼠Rho/ROCK信号通路的调控作用。方法临床研究:将93例符合脓毒症急性胃肠损伤（热结肠腑证）患者随机分为对照组、乌司他丁组与炎调方组:对照组为西医常规治疗,乌司他丁组为西医常规治疗基础上加用乌司他丁,炎调方组为西医常规治疗基础上加用炎调方。观察各组患者治疗前后中医证候评分、腹内压水平、肠鸣音次数、AGI评分、28天死亡率、SOFA评分、APACHE II评分、动脉血乳酸水平,ELISA法检测治疗前后血清Rho/ROCK信号通路相关指标、血清肠道黏膜组织损伤指标及血清炎症因子。实验研究:将120只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、乌司他丁组和炎调方组,每组各30只。采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症急性胃肠损伤模型。乌司他丁组大鼠予以生理盐水灌胃,并于造模后腹腔注射乌司他丁;炎调方组大鼠予以炎调方灌胃,并于造模后腹腔注射生理盐水。观察7天病死率、分光光度计检测肠黏膜通透性,HE病理染色、电镜观察回肠组织病理变化,ELISA法检测血清炎症因子、肠道黏膜损伤指标,免疫组织化学方法检测紧密连接蛋白表达,WB、RT-PCR检测Rho/ROCK信号通路相关蛋白和基因表达。结果临床研究:临床疗效方面,炎调方组的显效率要优于乌司他丁组和对照组（P＜0.05）;在中医证候总分方面,炎调方组治疗后从第5天开始,其中医证候总分明显低于乌司他丁组和对照组（P＜0.05）;在中医证候单证方面,炎调方的中医腹胀证候评分从第3天开始、腹痛证候评分从第5天开始、便秘证候评分从第5天开始、口渴证候评分从第3天开始均低于对照组（P＜0.05）,炎调方组的中医腹胀证候评分从第3天开始、腹痛证候评分在第10天、便秘证候评分在第5天和第7天、口渴证候评分在第3天及第5天和第7天均低于乌司他丁组（P＜0.05）。治疗后炎调方组的腹内压水平较乌司他丁组和对照组下降（P＜0.05）,肠鸣音次数较乌司他丁组和对照组好转明显（P＜0.05）。临床实验研究指标方面,炎调方和乌司他丁的MLC、MYPT-1、Rho A、ROCK1、D-La、DAO、I-FABP、IL-6、IL-8及TNF-α水平均较对照组下降（P＜0.05）,瓜氨酸水平和IL-10水平均较对照组上升（P＜0.05）。实验研究:炎调方组和乌司他丁组的病死率较模型组改善（P＜0.05）;炎调方组的肠道通透性FD-4、肠黏膜损伤评分、IL-6、IL-8、TNF-α、血清D-La、血清DAO、血清I-FABP、p-MLC/MLC蛋白水平、p-MYPT-1/MYPT-1、Rho A/ROCK-1m RNA均较模型组和乌司他丁组下降（P＜0.05）,而IL-10、血清和组织瓜氨酸、组织DAO、组织I-FABP水平、ZO-1、Claudin-1和E-cadnerin蛋白表达量均较模型组和乌司他丁组上升（P＜0.05）。结论1.本课题临床试验研究发现:炎调方具有减轻脓毒症AGI患者的肠道黏膜组织损伤程度以及调控炎症因子的作用。此外,炎调方还能较好地改善脓毒症致AGI患者的临床症状（腹胀、腹痛、便秘和口渴）和体征,其机制可能是通过调控Rho/ROCK信号通路。2.本课题基础实验研究发现:炎调方能通过调控Rho/ROCK信号通路,降低脓毒症致AGI大鼠的血清促炎介质IL-6、IL-8和TNF-α水平,升高抗炎介质IL-10水平,具有减轻肠道黏膜组织损伤以及保护肠道机械屏障功能的作用。
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