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【目的】：摸索和熟练掌握乳鼠离体脑片的培养技术；建立离体脑片谷氨酸(Glu)和过氧化氢(H202)的损伤模型；探讨神经生长因子（NGF）和银杏达莫预处理对乳鼠离体脑片Glu和H202损伤的保护作用及这种保护作用是否有差异性。 【方法】：取7天新生乳鼠皮层切成400μm厚度脑片置于有微孔膜的插入式培养皿内同时放入37℃,5％CO2、95%空气的标准培养箱内保持脑片在气液界面上进行培养。脑片培养成功后随机分为七组：A组（正常对照组），B组（Glu损伤组），C组（H202损伤组），D组(NGF预处理Glu损伤组)、E组(NGF预处理H202损伤组)、F组(银杏达莫预处理Glu损伤组)、G组(银杏达莫预处理H202损伤组)共7组（每组12个样本）。NGF预处理组以最佳浓度50ug/L进行预处理。银杏达莫预处理组以最佳浓度40mg/L进行预处理。D组和E组以50ug/L NGF预处理24h后分别以1mmol/L Glu和0.1mmol/L H202损伤30分钟，F组和G组以40mg/L银杏达莫预处理组24h后分别以1mmol/L Glu和0.1mmol/L H202损伤30分钟，将所有分组换正常培养基继续培养72h后观察。观察指标为：显微镜下脑片形态学观察；HE染色后脑片组织内细胞形态变化及透射电镜下细胞超微结构的变化；2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC)染色比色法测定各组脑片组织损伤率变化；检测乳酸脱氢酶（LDH）漏出率；使用免疫组织化学法检测神经细胞标记物热休克蛋白70（HSP70）阳性表达的变化。 【结果】：1.显微镜下培养脑片逐渐变薄向外迁移倾向、细胞形态完整、存活良好； A组HE染色脑片层次清楚，神经元数量多、密度大，胞核大而圆呈蓝色，胞浆染色浅呈淡红色，部分见明显核仁，神经元周围有较多圆形或椭圆形胶质细胞。B、C组HE染色脑片结构无A组丰富，神经元数量及密度明显减少，细胞空泡状，胞核固缩，部分细胞可见卷曲，皱缩变形，胶质细胞增多。D、E、F和G组脑片细胞数量减少不明显，可见少量细胞胞浆呈深红色，核固缩不明显。2.透射电镜下观察：A组见神经元细胞核仁明显，核染色质均匀，核膜呈两暗一明；细胞浆内各种细胞器丰富，可见大量散在核糖体、线粒体、粗面内质网结构完好。B、C组核膜破裂，核染色质边集，线粒体可见肿胀空化，粗面内质网溶解或消失。D、E、F和G组核膜、胞膜正常，胞浆内细胞器数量减少但不如A组丰富，核膜融合、裂隙变宽，细胞浆稀疏溶解现象，有的粗面内质网扩张见局灶溶解。3.乳酸脱氢酶（LDH）漏出率及脑片TTC染色组织损伤率结果：D、E、F和G组与B、C组比较，差异均有统计学意义（P均＜0.05）；4.A组HSP70神经细胞阳性表达不明显；B、C组HSP70神经细胞阳性表达明显；D、E、F和G组HSP70神经细胞阳性介于A组和B、C组两者之间。 【结论】：成功建立离体脑片损伤模型；NGF和银杏达莫预处理组对离体乳鼠脑片Glu和H202的损伤均有保护作用；NGF和银杏达莫的神经细胞保护作用二者比较（P均>0.05）无统计学差异。