条斑紫菜TPS基因转化马铃薯的研究

来源 :青岛农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:blueskyjandy
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
马铃薯是世界上重要的粮菜兼用型作物,马铃薯生长需要大量水分且对盐敏感,本研究目的是将条斑紫菜6-磷酸海藻糖合成酶基因(PyTPS)导入马铃薯后获得转基因植株,为筛选出耐盐、抗旱的转基因品系奠定基础。主要研究结果如下:   1、建立了以微型薯切片和茎段为外植体直接形成不定芽的再生途径   选用微型薯切片、试管苗茎段为外植体材料,建立了直接形成不定芽途径的再生途径。鲁引一号、夏波蒂、克新18、大西洋、费乌瑞它5个品种微型薯切片不定芽直接诱导优化培养基为:2MS+2mg/LIAA+1mg/L6-BA+4mg/LZT+6mg/LKT,分化率分别为95.0%、97.5%、87.5%、97.5%、82.5%;Desiree品种茎段不定芽直接诱导培养基为:2MS+1mg/LAA+1mg/L6-BA+2mg/LZT+3mg/LKT,分化率为90.1%。   2、建立了以微型薯切片和茎段为外植体愈伤形成与分化途径   5个品种微型薯切片愈伤诱导的培养基为2MS+4mg/L6-BA+0.5mg/LNAA,鲁引一号、夏波蒂、克新18、大西洋、费乌瑞它愈伤诱导率分别为92.5%、97.5%、82.5%、95.0%、77.5%,5个品种分化培养基为2MS+5mg/L6-BA+1mg/LZT,分化率分别为87.5%、95.0%、77.5%、95.0%、77.5%;Desiree品种茎段愈伤诱导的培养基2MS+2mg/L6-BA+0.5mg/LNAA,愈伤诱导率为90.1%,分化培养基为2MS+5mg/L6-BA+2mg/LZT,分化率为91.4%。不定芽在MS基本培养基上可顺利生根,形成完整的植株。   3、进行了试管苗耐盐性初步研究   将NaCl添加到MS基本培养基中进行盐胁迫实验。设置0%、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%NaCl浓度对马铃薯试管苗进行胁迫处理,结果表明,0.2%NaCl是植株普遍可以耐受的盐浓度。NaCl浓度增大到0.6%、0.8%、1.0%时,试管苗停止生长,均不能生根。   4、建立了农杆菌介导的转化体系,获得了转基因植株   建立和优化了转化体系:最终确定预培养时间为3天,Km的浓度为50mg/L,Carb浓度为500mg/L,农杆菌浓度为OD值为0.5,侵染时间为5分钟,共培养时间为2天。用农杆菌EHA105(pCAMBIA2300-PyTPS)侵染鲁引一号马铃薯的微型薯切片外植体,经卡那霉素抗性筛选获得了抗性不定芽,卡那霉素抗性植株经PCR检测扩增出了500bp的特异性片段,即获得了鲁引一号品种的转基因植株。   5、对转基因植株的耐盐性进行了鉴定   通过0%、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%和1.0%浓度的NaCl胁迫处理对转基因植株进行耐盐性实验,结果表明,NaCl达到0.4%和0.6%时,未转基因植株生长缓慢,不能生根,植株生长受到抑制,而转基因植株在NaCl浓度达0.8%仍能正常生根,生长速度也比未转基因植株快。结果表明转基因植物的耐盐性有一定的提高。
其他文献
该文在不同磁感应强度的磁场中,以液体酸(硫酸)为催化剂,研究了永磁场对乙酸乙酯酯化合成反应的影响.研究结果表明,外加永磁场对乙酸乙酯的酯化合成反应有一定的影响,永磁场
本文以一种高温煤焦油为原料,在高压反应釜中考察了分散型催化剂下高温煤焦油临氢热裂化反应行为和原料中的固体颗粒对其临氢催化热裂化生焦的影响。通过~1H-NMR、XPS、XRD和SEM等手段表征分析高温煤焦油中的沥青质、固体颗粒和反应后的悬浮焦,研究了固体颗粒影响高温煤焦油临氢热裂化反应生焦的机理。结果表明,高温煤焦油密度大,残炭值高,含有5.72%的固体颗粒;其中轻馏分油(IBP~350℃馏分)约占
学位
超分子化学是一门正处于前沿领域的新兴边缘学科,发展迅速。利用主客体分子识别理论对客体进行识别研究是比较引人注目的热点内容。本文概述了超分子化学的现状、主体化合物的
2013年伊始,我国中东部城市不时出现的雾霾天气再次为保护环境敲响警钟。降低油品中的硫含量成为我国亟待解决的问题。传统加氢脱硫(HDS)工艺难以实现对油品的深度脱硫,氧化脱硫(ODS)技术具有反应条件温和,操作简单,脱硫率高等优点。本课题将金属酞菁类化合物负载于三种载体上以制备负载型金属酞菁催化剂,将其分别应用于催化氧化脱硫的研究中。采用微波法合成了一系列不同中心金属离子和带有不同种类取代基的金属
牡丹(PaeoniasuffruticosaAndr.)是原产自我国的特有名贵花卉,被世人传为百花之灵。牡丹具有深休眠特性,适量的低温是打破牡丹花芽休眠的有效途径。黄鑫等以牡丹品种‘鲁荷红’为
本文就聚乙烯醇氧化脱水、脱氢制备线型碳进行了探索性研究。其中针对加热温度、保护气选择以及氧在制备中的作用几个主要方面做了深入研究,最终成功制备出β型线型碳,并论证
三聚氰胺甲醛树脂(MF)性能优越,广泛应用于木材、造纸、塑料、涂料、纺织、皮革、电气等行业.该文研究开发的脲醛预聚体改性三聚氰胺甲醛树脂(UMF)可用作造纸高效湿增强剂,其
碱性阴离子交换膜燃料电池具有电极反应速率高,燃料渗透率低,可使用廉价的非贵金属催化剂等优点。但由于其核心组件碱性阴离子交换膜的离子传导率较低,使其无法达到工业化的要求。所以,制备出离子传导率更高的碱性阴离子交换膜成为该领域的研发重点。本文采用向季铵化的聚醚砜中添加氢氧化镁纳米颗粒的方法,利用特殊形貌以及带电特性,诱导离子簇的聚集,提高离子传递通道的连续性,从而提高膜的氢氧根传导率本文首先通过微乳法