bFGF在中期角膜保存中的作用研究

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目的 探讨bFGF在中期保存角膜过程中,对角膜结构和功能的影响,以期改进中期角膜保存方法。方法 自制改良M-K液(mM-K其成分为:MEM/EBSS, 葡聚糖(40000),HEPES ,等)保存新西兰大白兔角膜,对照组为mM-K,实验组加入bFGF(10ng/ml),两组在30~34℃恒温条件下保存16~18h后,转入4℃低温保存,在保存3、5、7d分别抽取保存角膜片行30~34℃ 2h复温,台盼蓝-茜素红联合染色检测角膜内皮细胞活性;TUNEL原位标记,免疫荧光显微镜和电镜检测细胞凋亡情况;PCNA检测细胞增殖情况。结果 加入bFGF组保存角膜 ,角膜水肿较轻,皱褶较少,透明度较高,角膜细胞形态和内皮细胞活性较好;两组保存角膜,上皮、基质和内皮细胞均有细胞凋亡发生,并随保存时间的延长凋亡细胞明显增加(p<0.01)。bFGF组保存角膜与对照组比较细胞凋亡较少,细胞增殖较多,与对照组差异均有显著性(p<0.01)。结论 中期保存角膜细胞会发生不同程度的细胞凋亡,导致细胞活性丧失; bFGF在中期角膜保存中,有抑制和减轻角膜细胞凋亡发生,促进细胞增殖,保持角膜细胞结构和功能的作用;bFGF可以应用于角膜中期保存。
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