苦参碱对人横纹肌肉瘤RD细胞增殖、凋亡及Cyclin D1、Survivin表达的影响

来源 :徐州医学院 徐州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aiming4636j
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目的:观察苦参碱对人横纹肌肉瘤RD细胞的增殖抑制及促凋亡作用;探讨CyclinD1、Survivin基因在增殖、凋亡过程中的作用机制。  方法:采用体外细胞培养技术,应用不同浓度苦参碱(0,0.5,1.0,1.5,2.0mg/ml)分别作用人横纹肌肉瘤RD细胞株48h。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度苦参碱对RD细胞的增殖抑制率;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率及细胞周期的分布;RT-PCR法检测CyclinD1及Survivin mRNA的表达。  结果:MTT检测对照组与实验组增殖抑制率分别为(12.70±3.48)%、(31.16±6.43)%、(42.96±7.50)%、(57.26±8.02)%、(67.69±6.11)%;流式细胞仪检测对照组与实验组凋亡率分别为(3.33±0.29)%、(15.51±5.03)%、(26.17±4.07)%、(35.20±4.82)%、(46.09±4.06)%;以上检测实验组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),各浓度组间比较差异有统计学意义(P<0.05);0.5、1.0、1.5 mg/ml浓度的苦参碱处理细胞48h后,对照组与实验组G0/G1期细胞比例分别为(58.44±3.57)%、(64.79±2.03)%、(69.97±2.89)%、(75.03±1.23)%,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);RT-PCR结果显示,CyclinD1及Survivin mRNA在各组RD细胞中均有表达,实验组表达减少,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。其中CyclinD1各浓度组间比较差异有统计学意义(P<0.05),而Survivin仅0.5 mg/ml与1.5 mg/ml组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。  结论:苦参碱能明显抑制横纹肌肉瘤RD细胞的增殖,使细胞周期阻滞于G0/G1期,诱导其凋亡;其抗肿瘤机制可能与下调Survivin和CyclinD1 mRNA的表达有关。
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