猪水肿病(Edema disease of swine,ED)是由产志贺毒素大肠杆菌引起断奶仔猪的一种毒血症。该病发病急、死亡快,临床治疗效果不佳,死亡率高。目前用于检测大肠杆菌的方法虽多,但这些方法不能满足基层现场快速检测的要求。具有操作简单、快速便捷、特异型强、灵敏度高、成本低等特点的环介导等温扩增技术是近年来开发的一种新型的核酸扩增技术,该技术已经在病原微生物的检测中广泛应用。根据GenBank公布的产志贺毒素大肠杆菌重要毒力因子的Stx2e基因、F18ab基因序列中的保守序列,运用在线引物设计软件(http://primerexplorer.jp/e/)分别设计一套LAMP引物。在对反应体系中的Mg2+浓度、dNTP浓度、甜菜碱浓度、内引物浓度、Bst DNA聚合酶添加量、反应温度以及反应时间进行了一系列优化的基础上,分别建立了检测产志贺毒素大肠杆菌Stx2e基因和F18ab基因的LAMP方法。以Stx2e基因型、F18ab菌毛基因型的产志贺毒素大肠杆菌为阳性对照,以巴氏杆菌、葡萄球菌、沙门氏菌、鸭疫里默氏杆菌、链球菌、变形杆菌、产气荚膜梭菌、猪丹毒杆菌、F18ac菌毛型大肠杆菌等常见细菌为阴性对照,以超纯水为空白对照,分别对建立的LAMP方法进行了特异性实验,结果显示,只有产志贺毒素大肠杆菌为阳性结果,其它菌株均显阴性且未发生交叉反应。应用本研究建立的LAMP方法对83份疑似断奶仔猪水肿病病料进行检测,同时以常规PCR方法检测做对照,结果显示,两种检测方法的检测结果一致,检出率一致,但所建立的LAMP灵敏性显著高于常规PCR方法。