【摘 要】
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卡那霉素是一种常用的氨基糖苷类抗生素,不但能够治疗多种感染性疾病,而且能促进畜禽的生长,在农业和畜牧业等领域中被普遍使用。但由于滥用会导致牛奶等动物源性食品中其残留超标,并通过生物循环系统进入到人体内,会严重影响人体健康。卡那霉素的传统检测方法虽灵敏度高,但由于仪器价格高昂和前处理较繁琐,不能满足大批量样本的快速与现场检测要求。因而,开发灵敏、准确的卡那霉素残留快速检测方法具有十分重要的现实意义。
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卡那霉素是一种常用的氨基糖苷类抗生素,不但能够治疗多种感染性疾病,而且能促进畜禽的生长,在农业和畜牧业等领域中被普遍使用。但由于滥用会导致牛奶等动物源性食品中其残留超标,并通过生物循环系统进入到人体内,会严重影响人体健康。卡那霉素的传统检测方法虽灵敏度高,但由于仪器价格高昂和前处理较繁琐,不能满足大批量样本的快速与现场检测要求。因而,开发灵敏、准确的卡那霉素残留快速检测方法具有十分重要的现实意义。电化学发光(Electrochemiluminescence,ECL)适配体传感器是将适配体(Aptamer,Apt)作为分子识别元件并结合ECL技术构建的,因操作简便、灵敏度高、响应快等优点被广泛应用于农产品安全检测。鲁米诺(luminol)作为常用的发光体,具有廉价、无毒和发光效率高的优点,它的不同固载形式对传感器的性能与应用具有一定的影响,因此本文为实现灵敏、快速检测卡那霉素,对基于不同鲁米诺固载方式构建的ECL适配体传感器的检测性能进行了研究,主要内容如下:(1)利用鲁米诺-过氧化氢在碱性溶液中的化学发光特性,采用层层自组装法构建了一种检测卡那霉素的超灵敏ECL适配体传感器。纳米银作为有效的催化剂,可促进过氧化氢分解产生各种活性氧,用于信号放大,进而提高luminol的发光强度。该传感器的检测限(Limit of detection,LOD)为 0.06 ng/mL,对 0.5~100 ng/mL 的卡那霉素具有较好的线性关系。(2)为了简化传感器的构建,增强适配体在电极的固定效果,通过将鲁米诺置于测试底液中,构建了一种基于多壁碳纳米管(@二氧化钛/硫堇(MWCNTs@TiO2/Thi)的双信号放大的ECL适配体传感器。MWCNTs@TiO2具有较大的比表面积和良好的生物相容性,可以加速电荷转移,能够高负载luminol进而增强ECL响应。Thi可通过π-π堆积力与MWCNTs发生强烈相互作用,从而进一步增强MWCNTs的电活性,进而增强传感器的电子传输。该传感器的线性检测范围为1.0×10-1~1.0×105ng/mL,LOD为0.049 ng/mL。(3)为了提高传感器的灵敏度,通过将鲁米诺功能化的适配体作为信号探针构建了一种检测卡那霉素的夹心型ECL适配体传感器。传感器以聚乙烯亚胺-二硫化钼-多壁碳纳米管(PEI-MoS2-MWCNTs)复合物作为基质,为适配体1(Aptl)的偶联提供了大量结合位点。以鲁米诺功能化的适配体(Apt2-Ag-luminol-PAMAM)作为信号探针,通过卡那霉素与适配体的特异性结合构建出夹心型传感器。Ag-luminol-PAMAM复合材料可以产生稳定的ECL信号,而且PEI-MoS2-MWCNTs复合物可以加快电子转移速率,进一步提高传感器的灵敏度。该传感器的线性检测范围为1.0× 10-3~1.0× 103 ng/mL,LOD 为 0.21 pg/mL。上述研究为电化学发光适配体传感技术检测小分子污染物提供了新的方法,为农产品安全检测领域提供了新思路。
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